专用氨基酸分析方案用于细胞培养过程监控以及确定蛋...
专用氨基酸分析方案用于细胞培养过程监控以及确定蛋白质结构
简介
沃特世近期推出的 AccQ•Tag™ Ultra 氨基酸专用分析方案有更高的分离度和灵敏度，确保用户得到精确可靠的氨基酸定性和定量分析结果。这个方案来源于已经被广泛使用和认可的 AccQ•Tag 柱前衍生方法，得到的衍生物用沃特世 ACQUITY UPLC ® （超高效液相色谱）系统进行分离，可达到最佳分离度和更高的灵敏度，分析时间更短。系统控制，数据采集、处理和报告由 Empower™ 软件进行。这是一个整体解决方案，针对不同应用的仪器方法和数据处理方法都已经在应用光盘内预先设定好，直接调用即可获得进行分析。
UPLC 氨基酸分析应用方案
设计重点与成功分析的关键
• 所有氨基酸都达到基线分离
• 对每个峰进行准确定性
• 衍生反应副产物同氨基酸衍生物可以完全分离
• 3 个数量级的动态线性范围，保证对不同浓度水平的氨基酸准确定量
• 足够的电喷雾离子化灵敏度与稳定性
衍生反应过程示意图
使用 AccQ•Tag Ultra 衍生试剂（ 6- 氨基喹啉 -N- 羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯）对氨基酸进行衍生，伯氨基酸和仲氨基酸均可快速、定量完成衍生反应，操作简便，衍生反应还可以自动化进行（ batch wise ）。
• 衍生反应在大量水溶液存在的条件下进行，对不同缓冲液体系和不同组成的样品均可得到可靠的结果
• 样品无需进行特殊处理，也不需要真空干燥或提取
• 样品经衍生后的产物可稳定保存几天
• 过量的衍生试剂可在一分钟内水解为不干扰测定的 AMQ ，因此不需要去除过量衍生试剂的操作
• 衍生反应副产物同氨基酸衍生物可以通过色谱达到完全分离
为监测细胞培养过程中发酵液的成分，或者对发酵用培养基进行质量控制，需要分离其它种类的氨基酸。与标准分析方法相比，分析细胞培养液中的氨基酸在分析方法的参数设置上有些不同： AccQ•Tag Ultra 洗脱剂 A （浓缩液）的稀释倍数不同，还需要较高的柱温。其它参数相同。
