质谱沙龙第三十八期活动报道
空军总医院药学部主任药师 梁贵键老师
来自空军总医院药学部主任药师梁贵键老师为大家带来了《基于“科学•文化”双视角和“液相色谱•质谱•药品标准•体内分析”四维度初谈“我的梦•中国梦”》的报告。报告伊始，梁老师通过自己几十年的色谱分析工作，谈及了自己对“科学•文化”在分析工作的一些体会和看法。并再次介绍了其提出的“二分五性三码一谱”解决体内药物快速分析的新策略。
目前建立药物色谱分析方法仍处于反复摸索的偶然或然状态，或借助单纯形、窗口图法、重叠分辨率法和均匀设计等优化方法。与其紧密相关的基础性问题，至今未得到系统的研究。
要解决这样的问题，必须全面掌握内源性物质和常用药物的色谱行为以及预处理后被除去、纯化和富集的数据和规律。药物分析是高效液相色谱技术得到最广泛应用的领域，在药物HPLC分析中，国内外迄今还没有一个基于实验数值型数据库或能对流动相组成、内标选择和样品预处理方法三者进行推荐和仿真模拟的专家系统。梁老师所在实验室分析了300多种药物的色谱行为，提出了“二分五性三码一谱”解决体内药物快速分析的新策略。
“二分五性三码一谱”新策略
“二分”从分析样品性质上区分是药品分析还是生物药物分析，从药物结构上分清被测药物的酸碱性。“五性”即色谱性、检测性(响应性)、稳定性、 回收性和商品性。“三码”即色谱码、检测码和回收码。“一谱”即内源性干扰三维码。该方法的意义和作用可概括为：二分定原则，五性选药物，三码找方法，一谱除干扰。
北京艾米诺医学研究有限公司 苏晶博士
来自北京艾米诺医学研究有限公司的苏晶博士介绍了题为《新药临床前药代动力学研究》的报告。
临床前药代动力学研究可以获得一些重要的药动学参数，为设计和优化临床研究给药方案提供理论依据，了解药效或毒性的靶器官，阐明药效或毒性产生的物质基础，对拟定解毒措施有极其重要的知道意义。
苏晶博士阐述了临床前药代动力学的注意事项。实验药品选择上应提供受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。实验动物常选择小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬和猴等。动物体内药代动力学研究应设置至少三个剂量组，给药途径和方式应尽可能与临床用药一致。方法学考察中考虑药物在血浆中在线性范围内线性关系良好，精密度和准确度符合要求，提取回收率不低于80%，在室温放置24h，-20℃冻藏45d、3次冻融循环和处理后的待测样品在进样器中（4℃）4h的稳定性均符合要求。
在此基础上，苏晶博士取雌雄各半的SD大鼠通过单剂量灌胃给药和单剂量静脉注射进行了大鼠生物利用度的研究，首次建立了大鼠血浆中药物的LC-MS/MS分析测定方法，并将其成功应用于药物单剂量口服给药后在大鼠体内的药代动力学研究。该方法专属性强，且具有较高的灵敏度。药物在一定剂量范围内的药物动力学过程具有线性特征。即使在高剂量给药条件下，药物仍能够在动物体内正常代谢并顺利消除。对于难溶性药物，在水和乙醇中溶解度很低，尝试以二甲胺（DMA），后稀释在聚乙二醇和生理盐水中（二甲胺：生理盐水：PEG400=1:5:5，v/v/v）制成溶液剂给药，获得药物在大鼠体内的生物利用度。而在反相色谱系统中存在很严重的拖尾现象，尝试在水相中加入三乙胺，用磷酸调节水相pH值，乙腈-0.2%磷酸水溶液（含0.5%三乙胺）（69:31，v/v），峰型最好，与干扰物质分离度也较好。除此以外，在肺肝脾等器官中，均有较高浓度水平的药物被检出，该药物在生物体内分布广泛，十分有利于其药理作用的发挥，在动物脑中亦检测到药物的存在，说明该药物可透过血脑屏障。同时还利用HPLC-MS-MS技术鉴定了大鼠灌胃给药血浆、胆汁、尿液和粪便样品中原形药物和代谢产物，对这些化合物进行了电喷雾离子化质谱分析（MSn，n1-2），推测了各个代谢物的化学结构。依据提取离子色谱图中各质量数下对应色谱峰的绝对强度判断出I相代谢氧化产物和II相代谢的葡萄糖醛酸结合产物为其最主要的代谢形式。
目前新药药代动力学研究中常使用HPLC/MS研究药物的吸收阶段，在药物的分布和排泄研究中常使用HPLC-UV方法，在代谢阶段研究常使用HPLC-MS/MS方法。
AB SCIEX公司亚太应用支持中心 黄江博士
来自AB SCIEX公司亚太应用支持中心的黄江博士带来了题为《AB SCIEX质谱技术在临床研究分析中的应用》报告。黄江博士主要介绍了LC/MS/MS在临床研究分析的现状和应用实例。
通过经济上的考量、受实验结果报告周期、样品分析的具体需求和添加新检测方法的能力等多因素推动， LC/MS/MS在临床研究中的应用越来越广泛。目前应用领域有TDM（临床治疗药物监测）中免疫抑制剂、抗逆转录病毒、抗精神病药物、抗惊厥、抗病毒、苯二氮的测定；IEM中脂肪酸、氧化障碍、氨基酸、有机酸障碍、血红蛋白病、LSDs（溶酶体贮积症）等的测定；生物标记物中类固醇、维生素D、同型半胱氨酸、乳清酸、胆汁酸、肿瘤标志物和T3/T4的测定；临床有毒有害物质中一般未知物的筛选、药物的滥用、止痛药和Opiates的测定。AB SCIEX公司从事临床研究领域应用长达10年之久，在全球临床研究市场已安装超过500套系统，已经建立许多完善的检测试验方法。黄江博士强调：将来，AB SCIEX公司将更加重视和承诺为客户提供新产品的开发和技术支持，不断和客户一起合作开发新的应用方法。目前Mayo、ARUP、Quest、CDC、NIH、Kaiser实验室都和AB SCIEX有合作。
AB SCIEX之所以有这么多合作来源于公司综合质谱的强大优势。AB SCIEX质谱系统包括第一流的硬件和简单易用的软件，结合客户的实际需求建立专用的应用方案，使客户能够快速建立常规运作。AB SCIEX公司拥有适合食品和饮料、制药、临床和法医、环境的综合质谱产品系统。质谱系统配有独特的Turbo V离子源，独特的Curtain Gas气帘器接口，独特的LINAC线性离子加速碰撞室技术，独特的QTRAP混合三重四极杆和离子阱技术，再加上临床研究领域的iMethod Tests软件，使得AB SCIEX质谱成为临床研究领域的最有力工具。
黄江博士具体讲解了质谱分析TDM、新生儿筛查、维生素D和类固醇、临床毒物筛查的实验实例。LC-MS/MS在免疫抑制剂测定中具有很多优势。多种免疫抑制剂可以同时检测和定量，只要少量样品就可以得到高灵敏度结果，仪器选择性好，在复杂基质中干扰小。选择on-line样品净化，减少样品前处理，能够测定3-4个数量级浓度范围。LC/MS/MS分析维生素D可以节省溶剂、分析范围广、不要求特异性，一针进样可以同时分析多种成分，很可能取代免疫法成为类固醇类分析的主要方法。
最后黄江博士介绍了目前在国外AB SCIEX已经研发开展的临床领域的人们新领域。在医院有维生素D、尼古丁代谢物、生物标志物和临床毒物筛查的检测。在政府机构主要用于酒后驾车测定酒精代谢物，K2粉及其代谢物，兴奋剂和抗抑郁剂的检测。还有军队、飞行员的滥用药物筛查领域。
