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[机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点

2020.9.14

1、高速组织捣碎机

捣碎机转速可达10,000r/min,具高速转动的锋利的刀片,宜用于动物内脏组织的破碎。

操作:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。

特点:由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分子如核酸则很少使用。

2、组织匀浆器

制作匀浆器的材料通常用玻璃,还可以用硬质塑料、不锈钢、人造荧光树脂等。

操作:先将剪碎的组织置于管中,再套入研杆来回研磨,上下移动,即可将细胞研碎。

特点:匀浆器的研钵磨球和玻璃管内壁之间间隙保持在十分之几毫米距离。此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高,适用于量少和动物脏器组织。

但是,这种方法也较易造成堵塞;团状或丝状真菌、较小的革兰氏阳性菌以及某些亚细胞器,质地坚硬,易损伤匀浆阀,也不适合用该法处理。

3、研钵

多用于细菌或其他坚硬植物材料,研磨时常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨剂,以提高研磨效果。

值得注意的是:在研磨过程中局部往往生热导致变性或pH值变化,尤其是研磨玻璃粉和氧化铝时;而且磨细剂的吸附也可导致损失。

4、细菌磨

是一种改良了的研磨器,比研钵具有更大的研磨面积,而且低部有出口。操作时先把细菌和研磨粉调成糊状,每次加入一小勺,研磨20-30秒即可将细菌细胞完全磨碎。

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