生物样品的前处理技术--机械法进行细胞破碎
机械法主要是通过机械切力的作用使组织细胞破碎,有以下几种装置和方法可用于组织细胞的破碎。
①高速组织捣碎机 由调速器、支架、马达、带杆刀叶、有机玻璃管(筒口加盖)等部分组成,操作时将样品配成稀糊状液,放置于筒内(约占1/3体积),固定筒上的盖子,将调速器拨至最慢处,开动马达后逐步加速至所需速度,一般市售商品转速最高可达20000r/min。高速组织捣碎机适宜于动物内脏组织、植物肉质种子、柔嫩的叶和菜籽材料的破碎。
②玻璃匀浆器 由一个内壁经过磨砂处理的玻璃管和一根一端为球状(表面经过磨砂)的杆组成。操作时,先把绞碎的组织置于管内,再套入研磨杆,手工来回研磨,或把杆装在电动搅拌器上,用手握住玻璃管上下移动,即可将细胞研碎。匀浆器的内杆球体与管壁之间一般只有十分之几毫米,细胞破碎程度比高速组织捣碎机高,机械切力对生物大分子破坏较少。制造匀浆器的材料除玻璃外,也可是不锈钢、硬质塑料等。
③研磨 常用的有研钵和研磨。细菌及植物材料应用较多,加入少量的玻璃砂效果更好。
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