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集中化检测贮存标本对ALT测定结果的影响

2019.12.20

   【关键词】  丙氨酸氨基转移酶;保存温度;集中化检测;标本贮存

   集中化检测机构除了要对本单位的血样进行检测外,同时承担送检机构血样检测,受送检单位采血量多少以及运输条件的影响,送检单位采集的血液标本很难做到立即检测,由于血样保存温度和时间的不同,会使丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定值有不同程度的变化。本文就在不同时间、不同温度下保存血液标本对ALT检测结果的影响进行探讨,以期找到适合集中化检测工作中送检机构血样保存条件,避免ALT测定结果受到影响,确保临床用血安全,同时避免血液浪费。

  1 材料与方法

  1.1 标本来源 随机选择经健康询问,自述无继往病史,ALT快速检验合格的健康献血者血液标本40份, EDTANa抗凝,无溶血,无乳糜。

  1.2 仪器与试剂 日立7600010全自动生化分析仪(日本);和光ALT测定试剂盒(日本);久保田8100型离心机(日本);4℃冰箱(日本三洋),-20℃、-80℃冰柜(青岛海尔)。

  1.3 方法 将40份标本随机分成4组,每组10份,立即测得ALT的初始值,然后离心分离上层血浆,分别检测25℃、4℃、-20℃、-80℃条件下保存2 h、4 h、6 h、24 h、2 d、3 d、4 d、5 d血浆中的ALT值。

  1.4 统计学分析 计量资料以±s表示,采用t检验,P<0.05,为差异有统计学意义。

  2 结果

  不同温度下分离保存的血浆ALT检测结果,见表1。采用单因素方差分析各温度组保存时间对ALT活性的影响,见表2。

   3 讨论

  ALT是人体内促进氨基酸和α酮酸氨基转移的酶之一,存在于心、肝、骨骼肌和肾等器官,血清中含量很少,而肝细胞内ALT含量最高,为血浆的数百倍,当肝细胞损害时,大量的ALT渗入血浆中,使血液内的ALT显著升高,故ALT是肝脏功能诊断的重要指标之一,已被卫生部指定为采供血机构对供血者初筛和血液复检的常规检测项目[1]。ALT活性依赖于体温、pH值、电解质平衡等诸多要素的影响,一旦脱离了人体环境,其活性必然会渐渐丧失,本实验ALT活性总体呈逐步下降趋势,由实表1 不同温度下分离保存的血浆ALT检测结果表2 单因素方差分析各温度组保存时间对ALT活性的影响。验可见不同温度条件下,不同时间保存的血液标本ALT活性平均下降率不同。统计分析结果显示,血浆标本在25℃与-20℃保存,对ALT活性影响显著,而在4℃和-80℃保存ALT活性无显著变化。如果 5 d内能够实施集中检测,送检单位常常保存和运送全血标本,25℃保存的全血标本中细菌很易繁殖并产生大量代谢产物,导致红细胞破裂溶血,由于红细胞内ALT活性远远高于血清(浆),所以会导致ALT检测结果升高,必然会导致因ALT不合格血液报废率上升,除了放置温度对ALT影响较大外,放置时间对ALT活性影响也较大,随着时间的延长,血细胞对葡萄糖的酵解作用也会加剧,在酵解过程中会不断产生丙酮酸,丙酮酸作为ALT检测反应的中间产物,其值的高低直接影响ALT测定结果。因此,建议送检单位5 d内检测的血液标本在4℃条件下保存,而长时间保存的标本需分离出血浆部分,-80℃以下冷冻保存,而且应注意运送标本过程中保持低温冷链运输。

   【参考文献】

   1 中华人民共和国国家标准献血者健康检查要求.GB 184672001.


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