植物体内过氧化物酶活性的测定实验
实验方法原理 在过氧化氢存在下，过氧化物酶能使愈创木酚氧化，生成茶竭色4－邻甲氧基苯酚，在470nm波长处测定生成物的吸光度（A）值，即可求出该酶活性。
实验材料 植物叶片
试剂、试剂盒 磷酸缓冲液愈创木酚
仪器、耗材 分光光度计离心机离心管研钵移液管移液管架试管试管架洗耳球
实验步骤
一、材料、仪器设备及试剂
1. 材料：植物叶片
2. 仪器设备：分光光度计，离心机，离心管，研钵，移液管，移液管架，试管，试管架，洗耳球。
3. 试剂及配制：
0.1mol·L－1磷酸缓冲液（pH7）。
反应液（100 ml 0.1mol·L－1磷酸缓冲液（pH6）中加入0.5 ml 愈创木酚、1 ml 30﹪H2O2，充分摇匀）。
二、实验步骤
1. 酶液提取
称取植物叶片1g，剪碎置于已冷冻过的研钵中，加入少量石英砂，分两次加入总量为10 ml
pH7磷酸缓冲液，研磨成匀浆后，倒入离心管中，在8000 r / min离心15min，上清液即为粗酶提取液，倒入小试管低温下放置备用。
2. 酶活性测定
吸取反应液3 ml 于试管中，加入酶提取液0.02 ml（视酶活性可增减加入量），迅速摇匀后倒入光径1cm的比色杯中，以未加酶液之反应液为空白对照，在470nm波长处，以时间扫描方式，测定3min内吸光度值变化，取线性变化部分，计算每分钟吸光度变化值（△A470）。
三、酶活性计算
按下式计算酶的相对活性
推荐
-
项目成果
