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关于细胞培养你了解多少呢?

2021.5.31

 细胞常规培养是在细胞房中进行,在超净工作台或生物安全柜中,把细胞处理好,根据需要加入细胞培养基,放入细胞培养瓶/皿或细胞培养板中,再放到带有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养。

 细胞培养4要素
     1.类型:悬浮细胞/贴壁细胞
     2.培养基:(无)血清/Buffer/抗生素/无菌过滤
     3.培养环境:CO2浓度/O2浓度
     4.培养耗材:处理&未处理表面/特殊包被

 流程:

 1. 剪切组织 先将所取得的组织清洗剪切至糊状,静置片刻后,用吸管吸去上层液体,加入适当的缓冲液再清洗一次。

 2. 消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。

 3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为实验所需密度,分装于培养皿/培养板/培养瓶中。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液,一般7~14d可以长满瓶壁,进行传代。

 


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