关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

岛津UV一1800型分光光度计硬件的基本操作

2018.3.15

分光光度计的使用比较简单,以下以岛津UV一1800型分光光度计为例加以简单说明,该仪器可以使用主机上按键操作,也可使用计算机软件进行操作。

(1) 开机检查仪器的各个调节钮的位置是否在正确的位置上,检查确定样品室与池架上没有放置任何物品,打开仪器电源 (将开关打向“I”侧) ,开始执行各种自检及初始化。仪器通过后,使之预热30min,随后即可通过使用主机上按键进行测试操作。

如使用计算机软件进行操作时,需开启打印机、显示器及计算机主机电源,并在UV一1800主机的模式菜单中,按主机面板上按键F4功能键进入PC控制。运行UV Probe 2.31工作软件,点击【Connect】键,连接UV一1800和计算机。

(2) 设置测量方式 UV一1800型分光光度计有多种测量功能,包括动力学测定方式、光度测定 (定量) 方式和光谱测定等。测量前应首先选择测量方式,对于常规的定量分析,应选取光度测定 (定量) 方式。使用UV一1800主机上按键时,按键上有数字键0~9或者功能键F1~F4,可以根据测试需要选择屏幕上不同的模式与设置。选择模式或设置时,在按下数字或功能键之后,不用按ENTER键;当输入数值,比如波长设置或者显示模式等,必须按ENTER键设置该值。如使用软件菜单操作,具体的测量方式选择操作方法如下。

① 点击【Kinetics】键进入动力学测定方式:一般测定吸收值随时间的变化,通常用于酶反应随时间的变化。

② 点击【Photometric】键进入光度测定 (定量) 方式:可进行多波长、单波长、峰高定量。校准曲线可使用多点、单点、K因子等方法。

③ 点击【Spectrum】键进入光谱测定方式:可进行紫外-可见光-近红外区的光谱测定。

(3) 其它参数的设定 点击菜单栏上的【M】键,点击【Measurement】标签,根据提示在对话框中选择波长测定范围、扫描速度、采样间隔等参数;点击【Instrurrlent Parameters】标签,选择测定种类 (吸收值、透射能量、反射率) 及通带 (狭缝) 等条件。

(4) 吸光度的测量先点击【Baseline】进行基线校正,点击【Auto Zero】键进行仪器调零,打开样品室盖,将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中,将参比样品推 (拉) 入光路中,再盖上样品室盖。点击【Start】键即开始测定。完成后,取一个文件名并保存。
点击菜单栏上的【Report】键,根据需要选择报告格式。点击菜单栏上的【Print Preview】键预览,点击菜单栏上的【Print】键,打印输出报告。

(5) 关机在UV Probe界面上点击【Discorlnect】键,并退出操作软件。关闭UV一1800主机的电源开关 (将开关打向“O”侧) 。关闭计算机主机、打印机、显示器及总电源。取出样品池,并将样品池清洗并擦干,置于其专用的盒子。

(6) 比色皿的使用方法 比色皿的使用不当,不仅会大大降低分光光度计测量结果的准确性,给测量结果带来较大的误差,而且可能会损伤比色皿,缩短其使用寿命。

① 拿比色皿时,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要接触比色皿的透光面,以免沾污。

② 装盛样品时先向比色皿倒入少量的待测样品进行润洗,再加入其待测样品。以池体的3/4为度,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,应无溶剂残留。当待测样品浓度梯度较多,建议按浓度由低到高的原则,依次向比色皿加入待测样品。

③ 吸收池放入样品室时应注意方向相同。样品溶液放入仪器测量前应注意消除比色皿壁的气泡,并用镜头纸或柔软的棉布擦拭水珠。吸收池使用后,用擦镜纸或软棉织物擦去水分。

④ 测量挥发性或腐蚀性样品时,吸收池应加盖。

⑤ 吸收池使用完毕,应立即洗净并用蒸馏水冲洗清洁,并用干净、柔软的绸布将水迹擦净,以防止表面光洁度破坏影响吸收池的透光率。若吸收池透光内壁沾污,可用柔软绸布,滴上酒精液后,轻轻摩擦,再用蒸馏水冲洗清洁擦净,晾干防尘保存。

⑥ 尽量使用同一比色皿进行标准溶液与样品溶液的测定,以克服不同比色皿本身吸光差异造成的误差;同厚度多个比色皿同时使用时,在进行测试前均应进行校正和检查比色皿是否配套。具体方法为:分别向被测的比色皿里注入同样的溶液,把仪器置于某一波长处,如石英比色皿装蒸馏水在220nm处,将某一比色皿的透光率比值调至100%,测量其它各比色皿的透射比值,记录其示值之差及通光方向,如透射比之差在±0.5%的范围内则可以配套使用,若超出此范围应考虑其对测试结果的影响。同样地,可检查石英比色皿的700nm处或玻璃比色皿 (只供340nm以上波长处) 。


推荐
关闭