多聚酶链式反应PCR
多聚酶链式反应PCR ：
(1)PCR原理：在模板DNA、引物和4种脱氧单核苷酸存在的条件下依赖于耐高温的DNA聚合酶的酶促合成反应。以欲扩增的DNA做为模板，以和模板正链和负链末端互补的两种寡聚核苷酸做为引物，经过模板DNA变性、模板引物复性结合、并在DNA聚合酶作用下发生引物链延伸反应来合成新的模板DNA。模板DNA变性、引物结合(退火)、引物延伸合成DNA这三步构成一个PCR循环。每一循环的DNA产物经变性又成为下一个循环的模板DNA。这样，目的的DNA的数量将以2n的形式累积，在2小时内可扩增30(n)个循环，DNA量达原来的上百万倍；
(2)PCR过程：1. 模板DNA的变性：模板DNA经加热至95℃左右一定时间后，DNA双链被解离为单链并游离于溶液中的过程；2. 模板DNA与引物的退火(复性)：人工合成的一对引物在适合的温度下(通常50-65℃)分别与模板DNA需要扩增区域的两翼进行准确配对结合的过程；3. 引物的延伸：在适当的温度下(通常70~75℃)，以三磷酸脱氧核糖核苷(dNTP)为反应原料，DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，单链核苷酸从引物的3’末端掺入，沿靶序列模板,按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板.每完成一个循环需2一4分钟，在一个由计算机控制的循环加热器上经过三十个循环，就可以把原来的样品精确地扩增了2的30次方倍。PCR特点：快速，准确，安全检测病原体。
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