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活细胞的脂类染色的操作与应用

2020.4.04

脂类是脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)的统称。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质,脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。


在病理检验中,脂类染色法最常用于证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂滴(Lipid Droplet)是中性脂(主要有脂酰甘油和酯化胆固醇)的主要贮存场所,是脂肪细胞的主要成分,占据脂肪细胞的大部分空间。正常情况下,除脂肪细胞以外的其他细胞内一般不见或仅能看到微量脂滴。但病理情况下,这些细胞中可能出现脂滴或者脂滴明显增多,通过脂肪染色能将这些脂滴清晰的显现出来。比如,心、肝、肾等实质器官发生脂肪变性,胞浆内出现大小不一的空泡,可用脂肪染色来区分是脂肪变性还是水性变性或糖原贮存等。

目前脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等,这种脂肪染色方法,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色的过程,经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好,根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)会对组织切片产生较好的染色效果。

用苏丹染料进行脂类染色,多用用冰冻或石蜡切片,以水溶性封固剂封固,如甘油明胶和阿拉伯糖胶等,在免疫组化研究中应用较多。

苏丹染料主要针对于组织切片的脂质染色,同时灵敏度也较低,且存在操作过程中试剂挥发过多,易形成背景沉淀,无法兼容活细胞等局限。

作为专业的生命科学解决方案供应商,艾美捷科技为您推荐来源于神经科学领域领导品牌Biosensis的全球畅销产品: 兼容活/固定细胞或组织及其他染料的脂质染色试剂盒

产品名称 规格
Biosensis P1TM Polar Lipid Tracing Reagent 1.8 mg
Biosensis P2TM Polar Lipid and Endoplasmic Reticulum Tracing Reagent 1.0mg

TR-600-P1是一种对极性脂质具有亲和力的细胞渗透性荧光染色剂,可适用于各种活细胞、固定细胞和组织样品,可用于荧光显微镜应用和自动成像。该染色剂是脂质(例如胆固醇,鞘脂和磷脂)和细胞内定位的有效示踪剂,它可用于各种新鲜的样品和固定样品,并能轻松与其他染料兼容。

TR-603-P2是细胞内脂滴和内质网的细胞渗透染色剂,该示踪剂可用于活细胞和固定细胞,并与其他染料相容。

*特异性:

TR-600-P1:已经证实了其在一系列细胞系中的细胞渗透和定位功能,包括脂肪细胞(3T3-L1),前列腺细胞(PNT2,PNT1a,LNCaP,22RV1和DU145),心肌细胞(H9c2)和神经细胞(PC-12),以及组织; 包括脂肪组织(绵羊和果蝇),肌肉组织(绵羊心脏和骨骼)和脑组织(鼠)。

TR-603-P2:已经在心肌细胞,H9c2细胞系和LNCaP前列腺细胞中证实了TR-603-P2的细胞穿透和定位功能。

*荧光特性:

TR-600-P1:Ex/Em: 405 nm / 550 nm

TR-603-P2:Ex/Em: 405 nm / 600 nm

试剂盒保存:

收到试剂盒后,应在4℃条件下避光保存,有效期为6个月。该产品不含防腐剂,建议操作时使用无菌技术和适当的实验室程序。
 


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