细菌形态学检查实验——芽胞染色法
| 实验方法原理 | 芽胞(Spore)是细菌的休眠状态，对各种理化因素有强大的抵抗力，能耐受恶劣环境的影响。芽胞折光性很强，可经特殊染色法染色后，在光学显微镜下观察。本实验要求学生了解两种特殊染色法并认识这种细菌特殊构造。 |
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| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 |
一、威-康(Wiltz-Conkln)二氏芽胞染色法 1. 材料 破伤风杆菌（Clostridium tetani）24 h琼脂斜面纯培养物， 3%孔雀绿水溶液， 0.5%花红水溶液， 载物玻片。 2. 方法 （1）取破伤风杆菌培养物涂膜、干燥、火焰固定。 （2）滴加3%孔雀绿水溶液加热染色3～6 min，水洗。 （3）0.5%花红水溶液复染0.5～1 min，水洗，干燥，镜检。 3. 结果观察 芽胞染成绿色，菌体染成红色。 注意芽胞的形状、在菌体中的位置和大小(与菌体横径比较)。同时可能看到没有芽胞的繁殖体和失掉菌体的芽胞。 二、Moeller氏芽胞染色法 经火焰固定的细菌涂片，以5%铬酸水溶液处理2~10 min，充分水洗。用石碳酸复红染液加热染色1 min，水洗。用5%硫酸水短时间脱色(约5 s)，立即水洗。再用美蓝染液染色半分钟，水洗，吸干，镜检。结果芽胞染成红色，菌体染成蓝色。 展开 |
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