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酶活力测定的方法

2022.3.24

酶活力测定的方法很多,如化学测定法、光学测定法、气体测定法等。酶活力测定均包括两个阶段:首先是在一定条件下,酶与底物反应一段时间,然后再测定反应体系中底物或产物的变化量。一般经过以下几个步骤:

(1)根据酶催化的专一性,选择适宜的底物,并配制成一定浓度的底物溶液。所用的底物必须均匀一致,达到酶催化反应所要求的纯度。

(2)根据酶的动力学性质,确定酶催化反应的pH值、温度、底物浓度、激活剂浓度等反应条件,底物浓度应该大于5Km(Km见本章7.3.1.1)

(3)在一定条件下,将一定量的酶液和底物溶液混合均匀,适时记录反应开始的时间。

(4)反应到一定的时间,取出适量的反应液,运用各种检测技术,测定产物的生成量或底物的减少量。

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