二次PCR需要注意什么问题
二次PCR实际上与AFLP基本一样，做AFLP一般要进行预扩增和选择性扩增，而选择性扩增就是二次PCR。 有时在预扩增后直接取样品做选择性扩增，条带数很少，而且在PAGE觉上染色不明显，背景很深。预扩增后的产物稀释至少10－20倍，有时甚至要稀释100倍才能在选扩时候扩增出来DNA条带，这样扩增出来的条带在染色的时候很清晰，而且要比不稀释时候数量要多。 所以二次PCR至少要稀释15－20倍然后在设置一个浓度梯度进行扩增，观察效果，肯定会不错的。
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二次PCR实际上与AFLP基本一样，做AFLP一般要进行预扩增和选择性扩增，而选择性扩增就是二次PCR。 有时在预扩增后直接取样品做选择性扩增，条带数很少，而且在PAGE觉上染色不明显，背景很深。预扩增后的产物稀释至少10－20倍，有时甚至要稀释100倍才能在选扩时候扩增出来DNA条带，这样扩增出来的条带在染色的时候很清晰，而且要比不稀释时候数量要多。 所以二次PCR至少要稀释15－20倍然后在设置一个浓度梯度进行扩增，观察效果，肯定会不错的。
