血糖的测定(O-TB法和葡萄糖氧化酶法)(2)
三、激素对血糖浓度的影响
实验目的
通过观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后血糖浓度的变化，了解血糖微量测定的基本原理，掌握血糖正常水平及其测定的临床意义，以及复习血糖的来源、去路及其调节的有关理论知识。
实验原理
对两只家兔，分别在注射激素（胰岛素、肾上腺素）前后静脉取血，采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，以观察激素对血糖浓度的影响。
材料和试剂
（一）仪器设备
1．注射器及针头，消毒酒精棉球
2．试管及试管架
3．加样器
4．37℃水浴箱
5．722分光光度计
（二）试剂
1．北京化工厂葡萄糖测定试剂盒 2．抗凝剂：肝素、EDTA
3．肾上腺素：lmg／ml 4．胰岛素：4U／ml
5．二甲苯，凡士林
实验操作
（一）取血：
1．正常家兔2只（家兔1，家兔2），空腹16小时以上，称重。
2．兔耳缘静脉取血：兔耳去毛，用二甲苯擦耳，扩张血管，再涂凡士林防污染，刀片纵向划破血管，使血清入含有抗凝剂的试管中，边滴边摇，使血与抗凝剂充分混匀，每只家兔取血2~3ml血，取血后用干棉球压迫兔耳静脉止血。抗凝血采得后立即离心（3000r／min
l5分钟）分离血浆，置试管中，编号，分别标明测定管1和测定管2。
3．家兔1臀部皮下注射肾上腺素（0.4ml/kg），15分钟后，耳部取血2~3ml（方法同上），标明测定管3。
4．家兔2臀部皮下注射胰岛素（0.5ml/kg），30分钟后，耳部取血2~3ml（方法同上），标明测定管4。
（二）血糖测定：
家兔1：
| 测定管1 | 测定管3 | 标准管 | 空白管 | |
| 血清（或血浆） | 0.02ml | 0.02ml | / | / |
| 葡萄糖标准液100mg/dL | / | / | 0.02ml | / |
| 蒸馏水 | / | / | / | 0.02ml |
| 酶、酚混合试剂 | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
家兔2：
| 测定管2 | 测定管4 | 标准管 | 空白管 | |
| 血清（或血浆） | 0.02ml | 0.02ml | / | / |
| 葡萄糖标准液100mg/dL | / | / | 0.02ml | / |
| 蒸馏水 | / | / | / | 0.02ml |
| 酶、酚混合试剂 | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
混匀后37℃保温15分钟，使用722型分光光度计在505nm波长下比色，以空白管调零，分别测得A样和A标。
计 算
100为标准液浓度值mg/dl
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