八步帮您搞定液质质的定量分析
经过百年发展，LC-MS/MS越来越广泛应用于药物、食品、环境、法医、临床等各个领域。尤其在临床检测上适，用范围远远超过放射性免疫检测和化学检测范围，是其他方法无可比拟的。
LC-MS/MS具有灵敏度高，选择性强，准确性好等特点。那么，液质质到底比液质强大了多少倍？液质难道没有用武之地了吗？貌似也不太可能吧。。。
废话不多说，今天的重点是帮您搞定液质质的定量分析！
Hold不住，不要紧，照着这八步做，多做几次就差不多了，永远记住：孰能生巧！
第一步：Q1 SCAN——确定母离子的质荷比
根据待测化合物性质，选择分析的极性(＋/－)、离子化方式(ESI/APCI)，根据分子量选择扫描范围和时间
确定母离子的质荷比，准确到小数点后一位。
参数设置：
扫描方式：Q1 Scan；质量范围：Parameter Range，100～MW+30，t=1～2sec，Center Width，MW±5Da，t=0.5sec；通过手动调节DP、GS1，使喷雾平稳、有效。
第二步： Product Ion Scan —— 确定子离子的质荷比
得到高质量的MS2图，母离子的强度为图谱中基峰强度的1/3到1/4为宜
平滑后选择子离子质荷比，确定到小数点后一位
参数设置
扫描方式：Product Ion Scan；质量范围：Parameter Range，50～MW+10，t=1～2sec；
通过手动调节CE。
第三步： 优化化合物参数
根据前面选出的母、子离子，组建MRM离子对
选择多个离子对时，应合理分配每一对的分析时间
用“Ramp”，优化Compound项下各参数，以及Source项下CAD参数。各离子对应分别设定。
初步建立MRM方法
一般优化两次，以得到比较确切的结果
第四步： 方法转化：将连续进样方法→LC-MS方法
关掉所有质谱分析界面，将现有质谱体系灭活，激活液相色谱、质谱设备。
单击Acquire中Build Acquire Method，打开上面保存过的MRM方法，添加设备：色谱泵、自动进样器等。
设置色谱同步。
设置色谱参数，分析时间一般为0.6～1min，流动相组成和流量与实际样品分析时相同；修改质谱分析时间，与色谱参数一致；设置GS1、GS2、TEM初始值为40、40、400左右，保存方法，例如：LC-MRM.dam。
第五步：FIA-优化Source参数
将前面用过的样品溶液稀释100～1000倍。
在Tune项下，双击 Quantitative Optimization，选择FIA分析，
根据向导进行自动优化。 不接色谱柱进行FIA定量优化
注意：需要优化的各可选值之间用“;”分隔。
当对源参数含义及设置比较清楚后，可以省略此步。
第六步：色谱条件优化
接好并平衡色谱柱，用适当浓度标准品考察分离情况；
根据色谱分离情况，会设定梯度洗脱；
MRM方式可以不必所有峰都基线分离，但要注意避开；
基质离子抑制的干扰；
调整色谱流动相组成和流速，并相应调整源参数。
第七步：标准工作曲线的制作
空白基质添加标准品，稀释成不同浓度；
根据LC流动相组成，选择稀释液，配制实际样品；
编辑批处理文 件，排列进样顺序；
平衡MS离子源和色谱柱；
LC-MS/MS采集数据。
第八步：数据处理
标准曲线的制做、正确积分色谱图、有内标和无内标的计算方法。
图为重复步骤-流程图
要想熟练掌握“液质质”这些是必经之路！
查阅文献；
1 做好样品前处理，萃取 浓缩 分离 纯化；
2 有条件的可先在HPLC上摸好LC条件，能够基本分离更好，缓冲体系符合MS要求；
3 溶剂包括水的纯度，最好色谱纯以上；
4 新的色谱柱可能要先冲洗很长时间才能干净,某些样品非常容易；
5 吸附在进样阀和管路中，用溶剂清洗；
6 质谱仪须校准，预热时间要足够长，气流的稳定也很重要，液N；
7 气阀开度要注意，达到稳定程度。
8 MS条件优化—— 先定性后定量
9 LC条件优化
10 前处理方法的优化
11 数据处理
