高效液相色谱仪测定大豆油中脂肪酸
介绍了用高效液相色谱法分析大豆油中脂肪酸组成的方法皂化后的油不需要直接提取，直接形成脂肪酸苯乙酮，经梯度浸出大大缩短了分离时间该方法可直接应用于生物样品。
一、仪器和试剂
高效液相色谱仪，配紫外检 测器。
擦榈酸＞ 99％，
花生酸 ＞ 99％，
硬 脂 酸＞ 99.5％，
亚 油 酸＞ 99％，
亚 麻 酸＞ 99％，
油酸＞ 99，
8-溴乙酰苯酚（CP），使用前与正戊烷重结晶。
三乙胺(CC P)在使用前经精馏纯化其他试剂均为r级。
二、标准样的制备
将棕榈酸、油酸、亚油酸、亚麻酸、0.015g、0.005g硬脂酸和0.001g花生酸称重为10ml的N-二氧六环。取混合物0.3ml，用氮气干燥浓缩，以酚酞为指示剂，用0.1mol/l KOH乙醇溶液中和，在N:中再次吹扫酯化。
三、样品的前处理
加入0.05ml大豆油，加入5ml0.5mol/LKOH乙醇溶液回流30min取冷却液0.3ml以酚酞为指示剂，用盐酸乙醇（4:1v/V）溶液中和至终点氮气吹干酯化。
四、酯化
标准样品和大豆油样品分别加入0.2ml∞单溴苯乙酮丙酮溶液(12 mg/ml)和0.2ml羊乙胺丙酮溶液(10 mg/ml)，回流10 min后直接测定脂肪酸∞-溴苯乙酮酯混合物。
五、高效液相色谱仪分析条件
ODS柱：4.6×150mm
柱温：室温
波长：254nm
流动相：甲醇-水-高氯酸（85-14.75-0.25）为起始洗脱液13分钟后，洗脱液变为100%甲醇，直到分离结束。
流速：2mL/min。
谱图用峰高法定量。
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