外用温经通络散对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠坐骨...
外用温经通络散对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠坐骨神经的作用
摘要
目的：观察外用温经通络散对奥沙利铂所致周围神经毒性大鼠坐骨神经的作用。
方法：30 只 wistar 大鼠， 随机分为正常组、模型组、中药组。 模型组和中药组腹腔注射奥沙利铂 3mg/kg，隔天 1 次，共 16 次。 从造模 d1起给予中药组温经通络散浸泡大鼠四肢及尾部；观察机械和温度刺激下大鼠行为学变化及坐骨神经纤维变化， 测坐骨神经传导速度变化。 结果：中药组和模型组出现机械过敏和超敏反应，冷刺激缩足次数增多；坐骨神经传 导速度减慢，中药组较模型组显著好转（P<0.01）；模型组坐骨神经纤维出现脱髓鞘，甚至空泡变性，中药组较模 型组减轻。
结论：温经通络散能够明显缓解周围神经毒疼痛，加快坐骨神经传导速度，有效降低奥沙利铂对坐骨神经的损伤。
关 键 词：奥沙利铂；周围神经毒；中药；外用
材料与方法
动物造模及分组处理雌性 Wistar 大鼠 30 只 （华阜康动物实验中心提供），SPF（specific pathogen free condition）级，体重 200±20g，实验前大鼠适应新环境 1 周。 根据体重随机分为正常对照组、模型组、中药组，每组10 只。 实验参照 Cavaletti[1]方法中的第 4 组造模
方法造模， 模型组和各中药组腹腔注射奥沙利铂3mg/kg，隔天 1 次，共 16 次；正常对照组腹腔注射 等体积 5%葡萄糖。 从造模 d1 起，中药组用浓度 为 0.2g/ml 中药室温浸泡四肢和尾巴，60min/d，模型组室温去离子水浸泡四肢和尾巴对照。
药品及实验仪器
中药复方（温经通络散）：淫羊藿、老鹳草、川乌、川芎、红花，由中日友好医院药学部制作成特 定浓度（每 20g 生药煎出 100ml 药液）的水煎剂。 奥沙利铂（进口）：50mg 溶解于 5%葡萄糖溶液，终浓度 lmg/ml。 Von Frey 纤维丝： 美国 Stoelting 公司。 智能冷热板仪：北京众实迪创科技有限公司。
BME-410C 型全自动热痛刺激仪： 中国医学科学 院 生 物 医 学 工 程 研 究 所 。 电 子 天 平 （AD-VENTUER OHAVS AR0604）。 生命信号采集系 统：北京中医药大学基础实验室。
1、行为学测试 机械痛觉敏感度测试：大鼠置于金属网上，盖以透明的有机玻璃罩，先适应环境 15min，待梳理 和探究活动基本消失后， 用 4g 和 15g 纤维丝（Von -Frey hairs，VFH） 轻轻地刺激大鼠后肢足 底，每侧足底 5 次，2 次刺激间隔 6s，大鼠在刺激 时间内或在移开纤维时立即出现快速的抬足反 应，记为阳性反应，而身体活动所引起的抬足反应 不记为阳性反应，测试完成记录双后肢抬足次数， 算出阳性反应概率 （阳性反应次数/10×100%）[2]。VFH 4g 刺激大鼠足底出现抬足反应即机械刺激感觉超敏反应；VFH 15g 刺激大鼠足底出现抬足 反应即机械刺激感觉过敏反应。
冷温度觉敏感性测试：打开冷板仪开关，将温 度设定在 4℃， 待温度恒定达到设定温度时将大 鼠放在冷板上， 罩上透明有机玻璃罩， 让其适应1min 后开始记录大鼠 5min 内抬足或舔足次数 ，身体活动或变换体位所引起的抬足反应不记为阳性反应。实验开始时测定行为学指标，各组之间无差异。
电生理测试
骨神经传导速度测试 （the sciatic nerve conduction velocity，SNCV）：0.3%戊巴比妥钠麻醉 大鼠，用弯剪前去大鼠左后肢的被毛，露出皮肤，沿着股骨干后缘剪开皮肤、肌肉，小心剥离筋膜肌 肉，暴露坐骨神经，用玻璃分针游离坐骨神经，在游离的坐骨神经上放置好生命信号采集系统的刺 激电极和记录电极， 给予刺激后相连的电脑上用 medlab6.0 记录神经传导信号，2 个记录电极记录 到的时间之差即潜伏期之差， 神经传导速度 v 即 2 个记录电极之间的距离 l 除以潜伏期之差 t（v=l/t）。
组织病理学观察
实验结束时每组选取 6 只大鼠坐骨神经，置于 10%的福尔马林固定液固定。 取材后，石蜡包 埋，切片厚度 6μm，切片后脱蜡，复水，HE 染色， 二甲苯透明后树胶封片，正置光学显微镜（Olym-pus）下，观察坐骨神经和背根神经节形态变化。
统计学方法
有数据采用 SPSSl9．0 软件进行数据处理 及分析，计量资料方差齐的应用单因素方差分析，方差不齐的应用非参数检验， 计数资料用非参数 检验。
本实验初步证明了温经通络散对奥沙利铂所 致周围神经毒性大鼠模型治疗的有效性， 但其中 药起效的主要成分及对奥沙利铂所致周围神经毒 性的作用靶点尚不清楚，仍需进一步验证和研究。
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焦点事件
