基于液质联用技术的中药化学成分鉴定方法学研究
中药是天然产物的宝库，里面蕴藏的秘密吸引着无数研究者前赴后继，而九十年代后期成熟的液相色谱质谱联用技术可能就是打开宝库大门的一把金钥匙!本论文以对治疗心血管疾病、抗肿瘤和抗炎效果较好的三味中药(灯盏细辛、苦参和金果榄)为对象，采用液质联用技术深入细致地分析了其中的天然活性化合物，示范了如何根据多级质谱碎片信息确定化合物的结构。
围绕着如何提高数据分析的智能化、简便化，设计了多个实用的算法和工具，并初步建立了基于Web浏览器的天然产物质谱检索系统，有望成为新一代天然产物结构确证系统的原型。
本文主要内容及学术贡献如下：
(1)建立了分析灯盏细辛和雪莲果酚酸类成分的LC\DAD\MSn方法；根据UV光谱和多级质谱，鉴定或推测了灯盏细辛中53个化合物，包括咖啡酰奎尼酸酯(CQAs)、CQA葡萄糖苷、丙二酸单酰CQA、乙酰CQA、咖啡酰-2,7-脱氢-3-去氧-2-辛酮糖酸衍生物(CDOAs)、咖啡酰-2,7-脱氢-2-辛酮糖酸衍生物(COAs)、黄酮、黄酮醇和二氢黄酮，大部分化合物为灯盏细辛中首次报道，其中19个为新化合物。
首次研究了CDOAs和COAs类化合物的裂解途径，其MSn中的离子2,5O-，3,6O-，4,6O-是它们的特征碎片。
(2)通过从苦参中提取和合成的方法，制备得18个含异戊烯单元的二氢黄酮、二氢黄酮醇和查尔酮，详细研究了它们在正离子和负离子模式下的ESI-MSn，再辅以高分辨质谱数据和模型化合物，建立了这一类化合物可能的裂解途径。
研究发现，黄酮B环2-OH在分子内与1位氧原子形成分子内氢键，使黄酮C环的RDA反应极易发生，在正离子模式生成1,3A+，负离子模式生成1,4A-。
此外，二氢黄酮在(+)ESI\MS2中的脱水也与2-OH有关。
甩E2消除机制成功解释了极少见的负离子模式脱水和脱甲醇现象。
二氢黄酮和对应的查尔酮异构体可通过比较(+)ESI\MS2中1,3A+和S+离子的相对丰度来区分，而它们的负离子模式多级质谱则没有区别。
(3)使用LC\DAD\ESI-MSn技术，建立了鉴定和比较中药金果榄的两种基源植物青牛胆和金果榄中化学成分的方法，该方法可同时分析植物中的异喹啉生物碱、二萜内酯和植物甾体三大类成分。
正离子模式下，根据这三类成分的各自不同的特征离子可快速判断提取物中化合物的类别：
异喹啉生物碱为[M]+或[M+H]+，二萜内酯为[M+NH4]+和\或[M+H-CO2]+，植物甾体为[M+H-nH2O]+(n=1-3)。
紫外光谱也有助于化合物类别的判断。
最终，通过与标准品对照确证了11个化合物，根据MSn数据推断了另外13个化合物的结构，其中2个为新化合物。
虽然青牛胆和金果榄两种植物中化合物的种类基本一致，但其含量差别很大，这可能会导致药理活性的不同。
(4)编制了Finnigan原始raw文件的数据转化程序raw2txt，为后继开发数据处理相关的算法奠定基础。
针对液质联用数据背景噪音的特点，设计了FMSA算法，比己报道的方法更能准确区分信号与噪音。
为提高全扫描质谱中加合离子判断的速度和准确度，编写了AddCal软件，软件支持用户自定义可被加合的离子。
MS2table可辅助研究者快速制作符合文章发表要求的多级质谱数据。
(5)提出了一种全新的基于液质联用数据的中药质控方法，该方法同时包含了化合物的定量和定性信息，弥补了以往色谱指纹图谱定性方面的不足。
(6)初步建立了天然产物多级质谱数据库，同时兼顾本实验室数据和文献已报道数据，既可作为实验数据的管理、查询系统，也可根据裂解途径快速判断未知化合物可能的结构
