实验概要

采用TAKARA的试剂提取水稻胚乳,主要是后期的胚乳RNA量偏少,不易提取!

实验步骤

1. 称量100mg的新鲜或者超低温冻结的植物RNA提取样品,迅速转移至用液氮预冷的研钵中,用研杵研磨组织,其间不断加入液氮,直至研磨成粉末状。

2. 向研钵中加入1000μL RNAiso-mate for Plant Tissue(TAKARA),将样品完全覆盖,然后室温静置,至样品完全融化,再用研杵继续研磨至裂解液成透明状。

3. 将匀浆液转移至1.5ml的离心管中,12,000g 4℃离心5min。

4. 小心吸取上清液,平均分至2个新的1.5ml离心管中。分别向上清液中加入等体积的RNAiso Plus(TAKARA),盖紧离心管用力振荡,待充分乳化后,室温静置5min。

5. 向混合液中加入1/5体积氯仿,盖紧离心管,剧烈振荡15s,待充分乳化后,室温静置5min。