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技术分享:细胞培养中如何预防老化?

2021.5.28

防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代完好;换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。如果感觉时间不好把握的话就多培养几瓶细胞,在不同的时间换液,后再来比较下,看什么时候换液好,得出自己的结论。

 

选择正确的血清与培养基:细胞对血清特别敏感,直接影响细胞的生长。一定要选择适合的血清不然就会因营养物质不协调而导致细胞老化;在间充质干细胞培养时必然要进行消化,但是消化对细胞的表面蛋白质有很强的破坏作用,因此不能长时间进行消化并且在选择消化酶时也要选择较为合适的pH和浓度,不然就会使细胞老化或者分化。虽然,老化细胞不会立即死亡,但其基因表达会发生变化,如果细胞老化现象严重,建议从种子库或工作库重新复苏细胞。

 

在进行细胞培养时,我们经常会听到一些专业名词,原代培养是什么?什么是世代数?细胞系是什么?。根据老师们的反馈,我们总结了以下容易混淆的概念供大家参考~

1、原代培养(Primary culture)

开始于直接取自生物体的细胞、组织或器官的培养称为原代培养。通常代表异质细胞群,很难标准化和繁殖。它们的寿命一般有限,而且已知它们会随着时间而改变其差异特征。

2、传代(Passage(Subculture))

细胞从一个皿里转移或传代到另一皿里的过程称为细胞传代。这是一个操作行为,无法准确定义细胞分裂次数。

3、传代次数(Passage number)

一种细胞被传代培养的次数称为传代次数。

4、世代数(Generation number)

一种细胞所经历的细胞数量倍增次数称为世代数。

5、群体倍增时间(Population doubling time)

在对数生长期中期细胞数量翻倍所需要的时间间隔称为群体倍增时间。

6、群体倍增次数(Population doubling)

在培养过程中细胞所经历的细胞数量倍增次数称为群体倍增次数。

7、细胞系(Cell line)

原代细胞经过第①次传代后增殖的细胞称为细胞系或亚克隆。随着细胞的传代,生长能力强的细胞会占据优势,终导致细胞群体在基因型和表现型上达到一定程度的均一性。

8、细胞株(Cell strain)

细胞系通过选择或克隆获得的具有特征的细胞系称为细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。

 




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