关注公众号

关注公众号

手机扫码查看

手机查看

喜欢作者

打赏方式

微信支付微信支付
支付宝支付支付宝支付
×

常用抗体的应用范围及选用(三)

2020.7.27

(三)肌组织及其相关肿瘤的常用抗体
1.肌间线蛋白(Desmin,DM)
在横纹肌的微细结构中,有明暗带之分,在明暗带的中央有一薄膜称为工膜。在心肌纤维结构中,也有相似的工膜。这些结构的主要成份就是由肌间线蛋白构成的。此外,在心肌的闰盘,平滑肌中,也含有肌间线蛋白。
Desmin为一种中间丝蛋白,正常时可分布于平滑肌细胞,心肌细胞骨骼骨细胞和肌上皮细胞。临床应用时常用来检测上述细胞来源的肿瘤如子宫肌瘤及肉瘤,胃,肠道 肌源性肿瘤各形,横纹肌肉瘤和肌上皮瘤等。
该抗体适应于各种组织切片,经抗原修复后结果更佳。
2.肌球蛋白(Myosin)
骨髓肌的微细结构在电镜下可见到肌原纤维是由1-2千条平行的肌丝集成的来组成,肌丝分为粗肌丝和细肌丝两种。粗肌丝由许多豆芽状的肌球蛋白组成。在心肌和平滑肌发育分化中期,也可见到肌球蛋白。
目前,临床应用的有两种抗体。
①Myosin(skeletal)
这种抗体用于检测骨髓肌及其来源的肿瘤它适合于各种切片,抗原修复后结果更好。
②Myosin(smooth Muscle)
这种抗体用于检测肌上皮及平滑肌细胞以及这方面来源的肿瘤,它适合于各种组织切片,抗原修复后可获得更好的结果。
3.肌动蛋白(Actin)
肌原纤维由两种成分组成,细肌丝和粗肌丝。细肌丝则由肌动蛋白,原肌球蛋白和肌原蛋白三种成分组成,其中的肌动蛋白,其分子呈球状,它们互相连接形成长链,每一条细肌丝都由两条肌动蛋白分子所构成。
现临床用于检测肌动蛋白的抗体有如下几种:
①单克隆小鼠抗人肌动蛋白,克隆为HHF35。它是一种广谱标记抗体,既可以用于检测骨髓肌和骨髓肌来源的肿瘤,也可以用于检测平滑肌,血管平滑肌,心肌,肌上皮细胞及其来源的肿瘤,它适合各种组织切片,不用微波抗原修复,也能获得很好的结果。稀释度为1:100。
②单克隆小鼠抗人肌动蛋白(平滑肌)克隆为1A4。该抗体主要用于检测平滑肌,心肌,血管平滑肌,肌上皮细胞及其来源的各种肿瘤,实验证明,毛细血管也可被清楚地显示出来。它适合各种切片,稀释度为1:100。
(四)淋巴组织及相关肿瘤检测的常用抗体
淋巴组织的肿瘤成分较为复杂,有些与其它上皮来源的肿瘤在形态上较相似,鉴别较困难。因而免疫组化对淋巴组织肿瘤的定性较准确。淋巴瘤是原发于淋巴结和淋巴结以外各种淋巴组织的恶性肿瘤。根据瘤细胞的形态和结构不同,把它们分成两大类即何杰金病(Hodgkins disease,HD)和非何杰金淋巴瘤,(Non-hodgkins lymphoma,NHL)。
应用抗体来检测淋巴瘤的抗体目前有很多,光CD系列就有百余种,虽然各类繁多,但临床常用的抗体,主要有以下几种:
1.LCA(Leucoyte common antigen)
该抗体主要用于检测正常白细胞即淋巴细胞(T.B),粒细胞,组织细胞和单核细胞及其来源的肿瘤。适合各种切片,不需特别处理。稀释度1:200。
2.T细胞
T淋巴细胞在胸腺中进行分裂分化,形成了具有各种特异性抗原受体的T细胞,因此它又被 称为胸腺依赖细胞。T细胞数量最多,功能又是多方面的根据它们的功能可将其分为 辅助T细胞,抑制T细胞和细胞毒性T细胞。
T淋巴细胞在淋巴结的分布通常在副皮质区,因此免疫组化显色后,在副皮质区可找到阳性细胞,临床常用的有两种抗体。
①T细胞,CD45RO克隆为人WHL-1
该抗体几乎可标记所有的胸腺细胞还可检测CD4和CD8以及成熟活化T细胞的静止T细胞亚群及其来源的淋巴瘤细胞,该抗体适合于各种切片,不需各种处理方法,仍可获得很好的结果,稀释度为1:100。
②T 细胞,CD3,克隆为PS1
该抗体用来检测正常和新生的T细胞,对早期的T细胞有较高的特异性。虽然它的特异性较高,但敏感性不如①号抗体。临床应用时,可两种抗体同时应用,以利于提高诊断的准确率。它不需各种方法处理。稀释度为1:100。
3.B细胞,CD20 克隆为L26
B淋巴细胞跟T淋巴细胞不一样,它的分化分裂是在胚胎肝及骨髓内进行。根据实验,在淋巴结中的B淋巴细胞,主要分布在滤泡反应中心。经实验证明,反应中心是B细胞各个时期转化的场所,基本上需经四个时期:
第一期成熟的小淋巴细胞接受抗原信息后体积逐渐增大,细胞核表面出现凹陷或沟纹似裂隙被称为小核裂细胞。第二期细胞继续增大,核周围有少量胞浆,如此被 称为大核裂细胞。第三期核逐渐变化发展,成为圆形或椭圆形,裂 纹也随着变化而消失,核内出现核仁,胞浆增多,RNA和蛋白质合成相继增多,此时被称为小无核裂细胞。第四期,细胞继续增大,比原来的小淋巴细胞大好几倍,核呈圆形或椭圆形,可见核分裂,胞浆丰富,被 称为大无核 裂细胞。由于B细胞在不同时期的变化,因此在标记时,应使用不同类型的抗体,对其不同时期进行标记和判断。
在临床应用中,检测淋淋巴瘤不象研究淋巴瘤,那样细致,只要将其分形就可以了。
该抗体不需特殊处理,稀释度为1:100。
4.骨髓组织细胞抗原,克隆:Mac387
应用抗体的呈色可将淋巴瘤分为三大类形即T、B淋巴细胞形和组织细胞形。该抗体可检测正常的粒细胞,血液中单核细胞和组织中的组织细胞及其来源的肿瘤。
该抗体不需特殊的处理方法,稀释度为1:100。
5.CD29
该抗体主要用于标记B 细胞主要用于,B细胞淋巴瘤,B细胞白血病等的鉴别诊断,标记时应做抗原修复。
6.CD56

推荐
关闭