用生长谱法测定微生物的营养要求实验
实验方法原理 微生物的生长繁殖需要适宜的营养环境，碳源、氮源、无机盐、微量元素、生长因子等都是微生物生长所必需，缺少其中一种，微生物便不能正常生长、繁殖。在实验室条件下，人们常用人工配制的培养基来培养微生物，这些培养基中含有微生物生长所需的各神营养成分。如果人工配制一种缺乏某种营养物质（例如碳源）的琼脂培养基，接人菌种混合均匀后倒平板，再将所缺乏的营养物质（各种碳源）点植于平板上，在适宜的条件下培养后，如果接种的这种微生物能够利用某种碳源，就会在点植的该种碳源物质周围生长繁殖，呈现出由许多小菌落组成圆形区域（菌落圈），而该微生物不能利用的碳源周围就不会有微生物的生长，最终在平板上呈现一定的生长图形。由于不同类型微生物利用不同营养物质的能力不同，它们在点植有不同营养物质的平板上的生长图形就会有差别，具有不同的生长谱，故称此法为生长谱法。该法可以定性、定量地测定微生物对各种营养物质的需求，在微生物育种、营养缺陷型鉴定以及饮食制品质量检测等诸多方面具有重要用途。
实验材料 大肠杆菌
试剂、试剂盒 合成培养基木糖 葡萄糖半乳糖麦芽糖蔗糖乳糖无菌生理盐水
仪器、耗材 无菌平皿 无菌牙签吸管
实验步骤
1. 将培养 24 h 的大肠杆菌斜面用无菌生理盐水洗下，制成菌悬液。
2. 将合成培养基溶化并冷却至 50℃ 左右，加入上述菌悬液并混匀，倒平板，
3. 在两个已凝固的平板皿底用记号笔分别划分成三个区域，并标明要点植的各种糖，如图所示。
生长谱法测定大肠杆菌碳源要求示意图
4. 用 6 根无菌牙签分别挑取 6 种糖对号点植。
5. 待糖粒溶化后再将平板倒置于 37℃ 温室保温18～24 h ，观察各种糖周围有无菌落圈。
注意事项
1. 点植时糖要集中，取糖量为小米粒大小即可，糖过多时，溶化后糖溶液扩散区域过大会导致不网的糖相互混合。
2. 点植糖后不要匆忙将平板倒置，否则尚未溶化的糖粒会掉到皿盖上。
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