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荧光分子的最大激发波长和最大发射波长的关系

2020.10.29

  任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱。由于斯托克斯位移,荧光发射波长总是大于激发波长。并且,由于处于基态和激发态的振动能级几乎具有相同的间隔,分子和轨道的对称性都没有改变,荧光化合物的荧光发射光谱和激光谱形式呈大同小异的"镜象对称"关系。

  荧光激发光谱是通过测量荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱。它是荧光强度对激发波长的关系曲线,它可以反映不同波长激发光引起荧光的相对效率;荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光,它是荧光强度对发射波长的关系曲线。它表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度。由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长值,所以,可用它来鉴别各种荧光物质。

  可以依据绘制其激发光谱曲线时所采用的最大激发波长值来确定某荧光物质的分子荧光波长值和绘制荧光光谱曲线。同一荧光物质的分子荧光发射光谱曲线的波长范围不因它的激发波长值的改变而位移。由于这一荧光特性,如果固定荧光最大发射波长(λem),然后改变激发波长(λex),并以纵坐标为荧光强度,横坐标为激发光波长绘图即获得激发光谱曲线,从中能确定最大激发波长(λex)。反之,固定最大激发光波波长值,测定不同发射波长时的荧光强度,即得荧光发射光谱曲线和最大荧光发射波长。

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