胸腺五肽的检查方法
氨基酸比值取本品适量,加盐酸溶液(1→-2)于110℃水解24小时后,照适宜的氨基酸分析方法测定。以精氨酸、门冬氨酸、赖氨酸、酪氨酸、缬氨酸的摩尔数总和除以5作为1,计算各氨基酸的相对比值,精氨酸、门冬氨酸、赖氨酸、酪氨酸、缬氨酸均应为0.8~1.2。碱度取本品适量,加水5ml使溶解并稀释制成每1ml中含1mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为7.0~9.0。溶液的澄清度与颜色取本品5mg,加水5ml溶解后,依法检查(通则0901第一法和通则0902第一法),溶液应澄清无色醋酸取本品适量,精密称定,加稀释液[流动相A(通则0872)甲醇(95:5)溶解并定量稀释制成每1ml中含10mg的溶液,作为供试品溶液。照合成多肽中的醋酸测定法(通则0872)测定,含醋酸不得过0.5%。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,加流动相溶解并稀释制成每nl中含5mg的溶液对照溶液精密量取供试品溶液1m1l,置100m1量瓶中用流动相稀释至刻度,摇匀。色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸盐缓冲液(pH7.0)-甲醇(90:10)为流动相;检测波长为275nm;进样体积20pl系统适用性要求理论板数按胸腺五肽峰计算不低于1200测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图至主峰保留时间的2.5倍限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液的主峰面积(1.0%),各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0%)。残留溶剂照残留溶剂测定法(通则0861第二法)测定内标溶液取正丙醇适量,精密称定,加水溶解并定量稀制成每1ml中含0.1mg的溶液。供试品溶液取本品约0.1g,精密称定,置20m1顶空瓶,精密加入内标溶液1ml使溶解,密封。对照品贮备液分别精密称取甲醇、乙醇、乙醚、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺适量,置100m1量瓶中,加10ml二甲亚砜使溶解,用水稀释至刻度,摇匀。对照品溶液精密量取对照品贮备液1ml,置10ml量瓶中,用内标溶液稀释至刻度,摇匀(每1m分别含甲醇300g醇500g、乙醚500g、乙腈41g、二氯甲烷60μg、四氢呋喃2g、吡啶201g、N,N-二甲基甲酰胺88μg),精密量取1ml,置20m顶空瓶中,密封色谱条件以6%氰丙基苯基94%二甲基聚硅氧烷(或吸性相近)为固定液的毛细管柱为色谱柱,0.32mm×30m;起跆温度为40℃,维持4分钟,以每分钟10℃的速率升温至40℃,维持1分钟,再以每分钟20℃的速率升温至220℃,维3分钟;检测器温度为250℃;进样口温度为230℃;顶空瓶衡温度为90℃,平衡时间为30分钟。系统适用性要求对照品溶液色谱图中,按甲醇、乙醇、乙醚、乙腈、二氯甲烷、四氢呋喃、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺的序出峰,各峰间的分离度均应符合要求测定法分别取供试品溶液和对照品溶液顶空进样,记色谱图。限度按内标法以峰面积计算,甲醇、乙醇、乙醚、乙腈氯甲烷、四氢呋喃、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺的残留量均应合规定。水分取本品,照水分测定法(通则0832第一法)测定,水分不得过5.0%。
