聚丙烯酰胺凝胶电泳仪毛细管柱的制备方法
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪（CGE）是将聚丙烯酰胺在毛细管内交联生成网状多孔凝胶，凝胶具有多孔性，有类似分子筛的作用。荷质比相等但大小不同的分子在电场作用下发生迁移，其运动速度受到凝胶网状结构的阻碍，大分子受到的阻力大，移动速度慢，小分子受到的阻力小，移动速度快，从而得以分离。蛋白质和DNA等的荷质比与分子大小无关，在CZE分离模式中淌度几乎没有差别，很难分离，采用CGE能获得良好分离，是研究DAN排序的重要手段。
聚丙烯酰胺凝胶电泳仪毛细管柱的制备方法如下：
一、检测窗口制备：
毛细管的聚酰亚胺涂层不透明，检测窗口部位的聚酰亚胺必须剥离除去，剥离长度为2～3mm。
常用剥离方法有硫酸腐蚀法、灼烧法和刀片刮除法。
二、毛细管内壁修饰：
用120℃热空气吹，然后用室温氨气冲洗2h，再用50%3－甲基丙烯酰氧丙基－三甲氧基硅烷充满12h，zui后用甲醇和水冲洗。
三、缓冲溶液制备：
将1.1gTris和0.01g EDTA溶于100mlL 7M尿素溶液中，用NaH2PO4调至pH = 8.6。
四、单体溶液制备：
将29g丙烯酰胺和1g N－甲叉双丙烯酰胺溶解在100mlL缓冲溶液中。
五、催化剂制备：
将0.2g过硫酸铵溶于2mL缓冲溶液中。
六、凝胶溶液制备：
将10mlL单体溶液加入到30mlL缓冲溶液中，用4μL催化剂溶液和2.5μL四甲基乙二胺（TEMED）预聚合45min。
七、灌注聚合：
将上述凝胶溶液注入毛细管到无气泡，将柱两端浸入缓冲溶液中聚合数小时。
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