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单细胞培养有哪些注意要点?

2021.5.27

单细胞培养从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术,人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现的。

  细胞间实现信号传递交流,采用三明治方式将PET/PC膜嵌在两板之间,除了细胞本身,培养基中其他成分都可以自由通过PET/PC膜,达到细胞间信号传递交流的目的,配合10cm培养皿使用,适用于任何不同类型细胞间的共培养,培养皿底部的饲养层细胞可以为目的单细胞提供细胞生长因子,促进其生长增殖。

  细胞培养是采用无菌操作的方法,模拟动物体内的生理条件,在体外进行培养.使其不断地生长、繁殖,从而观察细胞的增殖、分化以及细胞衰老等过程的生命现象。常见的细胞培养方式可分为贴壁和悬浮两种。细胞培养的常规操作包括:1)细胞的接种和传代;2)细胞计数;3)细胞的复苏和冻存。

  单细胞培养相对常规细胞系的培养有哪些注意要点?

  1) 细胞的取材来源:取材应注意组织类型、分化程度、年龄等,一般来讲,胚胎组织较成熟个体组织容易培养,分化低的较分化高的组织容易生长,肿瘤组织较正常组织容易培养。

  2) 取材应严格无菌:确保所取材料及器皿手术器材无菌并在无菌条件下操作。

  3) 防止邻近组织细胞的污染:分离时要仔细去除所取材料上的血液、脂肪、坏死组织及结缔组织,可根据客户要求进行细胞的免疫化学检测。

  4) 状态难以调整:受到取材困难等因素的影响,获得的细胞量少,细胞状态不佳造成的细胞增殖缓慢往往造成实验室人员长时间进行细胞状态调整,无法获得足量的细胞进行后城检测实。




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