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常用酸、碱、盐溶液配制方法大全(三)

2020.2.22

   21.酚/氯仿溶液

  【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。

  【注意】酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

  22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液

  【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

  【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节 为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

  23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

  【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。

  24.1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液

  【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中,用2mol/L乙酸调节 pH值至7.5后加入纯水定容到1L,保存于-20℃。

  25.乙酸钾溶液(用于碱裂解)

  【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水,即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。

  26.3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液

  【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节 pH值至5.2或用稀乙酸调节 pH值至7.0,加水定容到1L,分装后高压灭菌。

  27.5mol/L NaCl溶液

  【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L,分装后高压灭菌。

  28.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液

  【配制方法】在900ml水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃助溶,加入几滴浓盐酸调节 溶液的pH值至7.2,加水定容至1L,分装备用。

  【注意】SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS,10%SDS溶液无须灭菌。

  29.20×SSC溶液

  【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/l NaOH溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。

  30.20×SSPE溶液

  【配制方法】在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA,用NaOH溶液调节 pH值至7.4(约需6.5ml 10ml/L NaOH),加水定容至1L,分装后高压灭菌。

  31.100%三氯乙酸溶液

  【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml水,形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

  32.1mol/L Tris溶液

  【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris碱,加入浓HCl调节 pH值至所需值。应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值,加水定容至1L,分装后高压灭菌。

  【注意】如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃并置备质量更好的Tris。

  尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1℃,pH值大约降低0.03个单位。例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

  33.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

  【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱,加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min,于室温保存。

  34.配制:

  乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.1mol/L)

  称取乙二胺四乙酸二钠盐40g,加热溶于1000ml水中,冷却,摇匀。

  乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.05mol/L)

  称取乙二胺四乙酸二钠盐20g,加热溶于1000ml水中,冷却,摇匀。

  乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.02mol/L)

  称取乙二胺四乙酸二钠盐8g,加热溶于1000ml水中,冷却,摇匀。标定:

  标定:

  0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液,取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.25g±0.0001g,用少量水湿润,加2ml稀盐酸20%使其溶解,加水100ml,用10%氨水调至PH=7~8,加10ml氨—氯化铵(pH=10)及铬黑T指示剂,用配制好的乙二胺四乙酸二钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白。

  C(EDTA)——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液量浓度 mol/L

  V1——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

  V2——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

  0.08138——与1.00ml乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液1.000mol/L相当的以克表示的氧化锌的质量

  附:其他常用溶液的配制

  1.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

  【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。

  【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。

  0. 1mol/l EDTA(pH8.0)溶液

  【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用2当量NaOH调节 溶液的pH值至8.0然后定容至1L。

  使用时稀释一百倍变成1mMol/l EDTA工作液。PH值调至8

  2.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

  【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节 溶液的pH值至7.4加水定容至1L,在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。

  3.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

  【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱,加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4,用蒸馏水定容至1L,分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min,于室温保存。

  Tris缓冲盐溶液(TBS)(50mmol/l Tris PH7.6)

  Tris缓冲盐溶液(TBS)(50mmol/l Tris)

  【配制方法】称取Tris(三羟甲基氨基甲烷)6.057g,加少许双蒸水溶解后加1HCL42ml,Nacl 8.5g,最后加双蒸水至1000ml,用1N HCL或NAOH调至7.6,充分摇匀,4℃保存。


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