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耗材专区血液中咖啡因的测定

2022.11.11

1、前言

咖啡因是一种黄嘌呤生物碱化合物，是一种中枢神经兴奋剂，能够暂时的驱走睡意并恢复精力，临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。有咖啡因成分的咖啡、茶、软饮料及能量饮料十分畅销，因此，咖啡因也是世界上最普遍被使用的精神药品。适度地使用咖啡因具有舒张血管、促进血液循环、预防高血压、心肌梗塞、利尿、解毒、抗氧化、抗衰老、减肥等药理和生理作用，但是，大剂量或长期使用也会对人体造成损害，能够导致“咖啡因中毒”，如神经过敏，易怒，焦虑，震颤，肌肉抽搐（反射亢进），失眠和心悸。中国把咖啡因列为“精神药品”管制，属于一种毒品。目前有关咖啡因检测分析的研究报道不多，为此本文通过使用SPE 1000全自动固相萃取系统对人体血液中咖啡因进行回收率测定分析，探索血液咖啡因样本检测的方法。

2、实验过程2.1仪器与试剂

SPE 1000全自动固相萃取系统，莱伯泰科

MV5多通道平行浓缩系统，莱伯泰科

LC600 二元高压梯度高效液相色谱，莱伯泰科

EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京莱伯帕兹检测科技有限公司货号：PZ12602）

血液替代品：牛血清，市售

2.2工作液配制

咖啡因标准储备液：100μg/mL

咖啡因标准工作液：取1mL标准储备液放入10mL容量瓶中，用甲醇定容配置成10μg/mL标准工作液

2.3实验部分

2.3.1样品制备

取血液样本1mL加入磷酸盐缓冲液1mL平衡，加入50μL标准工作液，混合均匀，加标浓度为500ng/mL，待固相萃取。

2.3.2净化与浓缩

EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京莱伯帕兹检测科技有限公司货号：PZ12702）用5mL甲醇乙酸乙酯（1：1）、5mL水和5mL磷酸盐缓冲液进行活化，取全部样液上样，上样结束后用2mL磷酸盐缓冲液和2mL水淋洗萃取柱，在真空状态下干燥0.5min，最后用5mL 磷酸盐缓冲液近干后，用流动相定容至1mL 。涡旋混匀，0.22μm滤膜过滤，待检测。

2.3.3 高效液相色谱检测条件

色谱柱：Promosil C18，5μm，4.6*150mm

波长：272nm

流速：1mL/min

柱温：40℃

进样量：20μL

流动相：甲醇-水= 24：76

3、实验结果

图1标准样品色谱图

图2加标样品色谱图

图3空白样品色谱图表1 加标回收率结果

4、结论

本次实验展示了一种使用EZsep^TMHLB固相萃取柱，（60mg/3mL北京莱伯帕兹检测科技有限公司货号：PZ12702）对血液中咖啡因进行萃取净化，其加标回收率95.8%~99.2%，重复性RSD为1.6%。说明EZsep^TMHLB固相萃取柱适用于血液中咖啡因的检测，并且在回收率和平行性上表现优异。

关于莱伯泰科北京莱伯泰科仪器股份有限公司（股票代码：688056.SH）成立于2002年，是一家专业从事实验分析仪器的研发、生产和销售的科技型公司。公司自成立之初便专注于科学仪器设备的研发，立志为环境检测、食品安全、医疗卫生、疾病控制、材料研究等众多基础科学及行业应用提供实用可靠的实验室设备和检测实验室建设整体解决方案。公司发展至今已拥有各类专利及软件著作权100余项，持续通过高新技术企业认证，连续多年被业内媒体评为中国仪器仪表行业“最具影响力企业”，是全球范围内能将多种类和多功能的样品前处理技术与全自动实验分析检测平台组合成全自动实验分析仪器系统的主要实验分析仪器供应商之一。公司拥有LabTech、CDS、Empore等行业知名品牌，在中国和美国设有研发和生产基地，并在中国内地主要城市、中国香港、美国马萨诸塞州和宾夕法尼亚州等地设有产品营销和服务中心。公司产品服务涵盖实验室分析仪器、样品前处理仪器、实验室设备、医疗设备、实验室耗材和实验室工程建设等，可为全球多种类型用户提供从实验室建设到样品分析的一站式解决方案。目前，公司产品已销往全球90多个国家，累计服务客户3万余家。

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