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糖肽富集知多少

岛津实验器材
2017.12.08

        糖基化是一种普遍存在并具有重要生物学功能的蛋白质翻译后修饰,与疾病发生、诊断、预后和治疗有密切的关系。基于生物质谱的糖蛋白质结构解析技术迅速发展,糖肽的富集也成为蛋白组学工作者密切关注的点,下面就来介绍下岛津技迩在糖肽富集方面的解决方案。

        不同于磷酸化肽用TiO2富集,糖肽在化学性质上属于极性比较大的一类,其富集方式也有所不同,通常使用氨基或者酰胺基柱等极性基团小柱来进行富集。

 MonoSpin NH2, Amide针对不同碳水化合物的富集方法:

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MonoSpin富集PA-标记的糖链时有机溶剂比例的影响:

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        作为研究样品溶剂与PA-标记的糖链回收率之间关系的比较,当样品溶解在80%至95%乙腈时,MonoSpin NH2具有高回收率。另一方面,使用MonoSpin Amide时,样品溶解在90%以上乙腈时回收率会降低,因此应特别注意溶剂的乙腈比例。

MonoSpin用于亲水化合物的回收:

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        使用MonoSpin NH2和MonoSpin Amide富集亲水性化合物时,两个小柱都可富集含PA-糖链和低分子糖基化蛋白。但是碱性血管紧张素难以保留在NH2固定相中,仅在Amide固定相中有保留。如果想全面回收碱性、酸性化合物,我们推荐MonoSpin Amide。

MonoSpin Amide 富集碱性肽时有机溶剂比例的影响:

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        用MonoSpin Amide回收亲水性多肽时,将样品溶解在95-98%的乙腈中,会更好的富集在小柱中,从而得到高回收率。

总结

- 使用MonoSpin Amide可以富集酸性,中性和碱性化合物。

- 通过使用MonoSpin形式整体硅胶小柱,前处理时间可以保持在5分钟以内,这对于需要快速前处理的用户是非常有吸引力的。

其他蛋白质组学产品介绍:

1:可以30min完成酶解的MonoSpin Trypsin HP 酶解柱

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2:针对极性和非极性肽的特色脱盐小柱GL-Tip

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GL-Tip SDB /GL-Tip GC(适合极性肽的脱盐,例如糖肽)

3:超高分离度的MonoCap HighResolution 2000 系列色谱柱

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整体硅胶填料技术的色谱柱可长达2-4米,具有超高分离度,可分离出更多蛋白,理论塔板数高达300000以上。


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