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TSKgel色谱柱清洗方法~SW系列尺寸排阻色谱柱~

东曹分离与纯化
2020.2.14

高效液相色谱柱是消耗品,会随着使用时间或进样次数的增加,出现柱效下降无法达到分离要求,或伴有峰型拖尾、分叉等情况。需要定期进行清洗和再生,以保证色谱柱的柱效和使用寿命。

不同类型的色谱柱都有与之对应的清洗方法。在本篇推送中先为大家介绍TSKgel SW系列硅胶尺寸排阻色谱柱的清洗方法


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根据样品性质,建议先从以下中选择适当的清洗方法,每一步清洗之间用纯水冲洗。清洗色谱柱时的流速与溶剂替换流速一致。

 


1去除离子性杂质

使用高盐浓度的流动相(例如:0.5M硫酸钠,pH3溶液)或酸性水溶液(例如:磷酸盐缓冲液,pH2.5)过柱清洗。


2去除疏水性杂质

在清洗液中添加10-20%的甲醇、乙腈等水溶性有机溶剂过柱清洗。


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如果采用上述两种方法清洗后色谱柱性能仍不能恢复,再考虑以下第种方法。


 3去除难溶性蛋白质或其他物质

在清洗液中添加6-8mol/L的尿素或0.2-0.3%的中性表面活性剂(Triton、Tween、Brij等)后过柱清洗。但需要留意的是尿素或中性表面活性剂可能会残留在色谱柱上。


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一般来说,清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。在吸附成分其吸附力极强时,即使进行过清洗,色谱柱性能也有可能得不到恢复。另外,请充分考虑清洗液的pH值,以避免损坏色谱柱。


小编将会在今后的推送中陆续给大家带来其他类型色谱柱的清洗及日常维护相关的内容,敬请期待~~

如您有色谱柱使用方面的任何问题,请联系东曹技术中心:021-34610856(227分机)


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