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采用TSKgel GMPWXL尺寸排阻色谱柱测定聚葡萄糖分子量

东曹分离与纯化
2023.2.24

聚葡萄糖(polydextrose)是一种水溶性的膳食纤维,它是由葡萄糖和少量山梨醇、柠檬酸经高温熔融,随机缩聚而成的多糖。至今已有50多个国家批准将其作为健康食品配料使用,被大量用于制造强化纤维食品,食用后具有保持肠胃通畅的功能。

本应用采用凝胶色谱法,使用了TSKgel GMPWXL (7.8 mmI.D.×30 cm, 13 μm) 色谱柱对聚葡萄糖进行分析,标准曲线线性关系优异,可满足聚葡萄糖国家药用辅料征求意见稿中的分子量测试要求:葡萄糖TP大于5000,线性相关系数大于0.99。



01
溶液配制

标准曲线的制备: 分别称取葡萄糖对照品、水苏糖、普鲁兰多糖(Mp 6100)、普鲁兰多糖(Mp 21100)及分子量为110KDa的支链淀粉标准品,用流动相溶解并稀释至2 mg/mL。

用上述5种标准品作为分子量标准溶液。重复进样,其保留时间相对标注偏差不得大于2%,以各峰的保留时间为横坐标,分子量对数为纵坐标作标准曲线,进行线性回归,相关系数不得小于0.99。

02
分析条件

仪器:Thermo Ultimate 3000  

色谱柱:TSKgel GMPWXL (7.8 mm I.D.×30 cm,13 μm)

流动相:0.1 mol/L 硝酸钠

流速:0.8 mL/min

柱温:45℃

样品盘温度:室温

进样量:50 μL

检测器:RI@35℃

03
分析结果

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图1  标准品叠图

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图2 分子量校正曲线

04
多糖类物质分析色谱柱的选择

HPLC-SEC是检测多糖类物质的常用分析手段,具有简便、精密度高等优点。东曹TSKgel水相SEC色谱柱采用了以亲水性乙烯基聚合物为基质的高亲水性填料,非常适合分析水溶性聚合物及多糖类物质。

该系列包括多款分子量排阻范围、粒径、不同级别尺寸的色谱柱,可适用于多种分析用途,如需详细了解请参考往期推文👉 水溶性聚合物分析用SEC色谱柱的选型


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