ATMP快速放行，支原体检测仅需3小时

赛多利斯实验室

2021.9.01

扫码
预约

9月9日晚7:30，赛多利斯微检产品专家马福成将在线分享药品微生物质量控制现状，以及基于qPCR技术的无菌快速检测方法。欢迎参加！

ATMP放行质量控制

ATMP (Advanced Therapy Medicinal Products)，是指基于细胞、基因或组织工程学的疗法。由于该类药物生产过程中需要确保其生物活性，且效期非常短，其质量控制也面临独特挑战，需要结合独特的生物学方法和标准的理化方法来进行，并且需要对每一个步骤和细节进行严格的质量把控，避免污染。

ATMP的微生物检测包括对细菌、真菌、支原体的污染鉴定。传统的微生物检测方法中，细菌及真菌的检测需要14天，支原体检测需要28天（图1），而许多ATMP的有效期仅有2天。快速、有效且安全的检测方法迫在眉睫。

图1. 无菌测试时间节点

据此，《美国药典》(UPS 1223) 微生物替代方法验证，《欧洲药典》（EP 5.1.6）微生物学质量控制的替代方法，以及《中国药典》(ChP 9201)药品微生物检验替代方法验证指导原则中都对药品微生物检测做出相应补充，并推荐核酸扩增（NAT）作为药品微生物检验替代方法之一。

“

与传统方法比较，或简便快速，或具有实时或近实时监控的潜力，使生产早期采取纠正措施及监控和指导优良生产成为可能。同时新技术的使用也促进了生产成本降低及检验水平的提高。

”

——<ChP 9201>

基于核酸扩增法（NAT）的支原体检测

目前风头最盛的ATMP要属CAR-T细胞治疗药物。2021年6月23日，中国首个CAR-T细胞药品奕凯达®获批上市，开启了中国肿瘤细胞治疗新篇章。在其中支原体检测步骤中使用到了赛多利斯Microsart®系列试剂盒。

支原体是世界上最小的能够独立繁殖的原核微生物之一，显微镜下难以观察到是否发生支原体污染。基于qPCR的支原体检测，克服了传统技术在检测周期长和检测样品类型受限制等方面的问题。

表1. 药典支原体检测方法对比

方法	优势	劣势
培养法	灵敏度高检测限：0.1 CFU/mL	培养期过长（28天）需使用多种培养基对不同种类支原体进行检测标准支原体培养基难以培养出一些种类的支原体，比如：猪鼻支原体
指示细胞法	成本较低	灵敏度低培养期较长（7天）
基于NAT的方法	灵敏度高检测限：10 CFU/mL 检测速度快	样本制备及DNA提取的质量会影响检测结果可靠度需要DNA提取试剂盒与核酸扩增设备需要验证与培养法和指示细胞法的可比性