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问君几多愁，恰似一支氨基柱超难留!
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当您使用氨基柱时，有没有遇到在使用一段时间之后，柱效下降、柱压升高，使得检测结果逐渐达不到要求？或者柱子在使用过程中出现异常干扰峰，或者保留时间出现漂移，与之前的检测结果有较大偏差？又或者是柱子的专一选择性，使得在特定色谱条件下方法得不到重现，分离度、柱效和拖尾因子达不到检测要求？由于氨基柱的独特性，进而使用问题较多，这给我们带来了很多的困扰，那么今天就来谈谈氨基柱。
氨基柱的键合官能团是氨丙基，这种官能团比常规的C18、C8和C4易水解，所以在使用氨基柱之前，我们就要做好心理准备，氨基柱的使用寿命比常规色谱柱要短很多。
氨基柱既可以做正相，也可以反相使用，而这两相溶剂是不能互溶的，所以如果在正反相进行切换使用时，需要用异丙醇进行过渡。下面将分别谈谈氨基柱在正反两相中的使用与维护注意事项。
反 相
✨反相使用时，如果流动相不含有酸碱盐，做样结束直接用100%的乙腈进行冲洗和保存即可。若含有酸碱盐，首先用60%的乙腈水冲洗40min，然后再用100%的乙腈冲洗和保存；
✨反相使用时，注意流动相的pH范围，pH越低越容易水解，理想的pH范围是3-7，流动相中水的比例越高，也越容易水解。
PS：柱子使用后，冲洗后建议保存在纯的有机相中，这样能获得良好的保存效果以及延长柱子的使用寿命。此外如柱子出现了柱压升高，峰形异常，柱效和分离度下降等异常情况后，可以先用过渡流动相冲掉色谱柱的盐，再分别以做样流速用100%乙腈→100%甲醇→100%异丙醇→100%乙腈进行冲洗，每项冲洗30分钟，其中异丙醇由于黏度大，所以需要降低流速。
正 相
柱子的冲洗使用100%的正己烷，然后使用正己烷/异丙醇（90/10）进行保存。
此外，正相色谱中，固定相的水分含量是影响选择性的关键参数，而流动相存在的水分含量会影响到保留时间和分离度，所以出现保留时间波动较大，可以归因于固定相和流动相中水分的变化，建议对氨基柱进行除水：
✨去除固定相中的水分：
用含2.5%二甲氧基丙烷（dimethoxypropane）和2.5%冰醋酸的正己烷冲洗色谱柱30倍柱体积；
✨使用水分含量可控的流动相（比如水半饱和）：
半饱和流动相配置：将无水的非极性流动相分成两半，其中一半中加入一定量水，并混匀搅拌约1小时，静止分层后，将多余的水相全部除去，将两部分重新混合在一起就配成了“半饱和”流动相。
PS：如果出现柱压升高、分离度和柱效下降等异常情况，建议用100%异丙醇→100%甲醇→100%异丙醇以分析流速分别冲洗，每项冲洗40分钟。同样，异丙醇冲洗时需降低流速。
乳糖专用柱
月旭还有一款特殊氨基柱，乳糖专用柱 Xtimate®Lactose-NH2，我们建议采用纯乙腈进行冲洗和保存，如果柱压升高，分离度和柱效下降等异常情况，可以用纯甲醇→纯乙腈→纯异丙醇→纯乙腈分别进行冲洗，每项3小时。
在使用乳糖专用柱检测时，如果出现噪音增加、漂移增大、分离度达不到或者柱效不够等异常情况，需要注意以下几点：
✨流动相混合在一起，充分摇匀，真空抽滤，超声脱气10分钟，使用一个通道运行，不要使用在线过滤器；
✨进样体积需要严格按照药典要求，进样10μL，尽可能地将定量环更换成10μL定量环，减小柱外死体积的影响，下面左图和右图分别是进样20μL和进样量10μL的色谱图，对比非常明显；
✨由于示差检测器对温度的变化比较敏感，建议将柱温箱用干毛巾或者干的棉花填充，充当传热介质，使得有更好的基线噪音和色谱效果。
由于氨基键合官能团独特的极性，易水解，导致氨基柱的使用寿命较其它常规色谱柱要短，所以我们需要认清这个事实。希望以上的使用和维护方法可以帮到您，极大地延长氨基柱的寿命。
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