技术服务详细描述

  构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上，载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素（neomycin）、潮霉素（hygromycin）和嘌呤霉素(puromycin)，常用G418来代替新霉素进行选择性筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组，进行长时间的稳定表达，因此，慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。

吉满生物制备的带puromycin抗性的慢病毒，在感染目的细胞后，可通过加入puromycin进行选择性筛选，从而获得稳定表达shRNA或者特定基因的细胞株。

服务优势

生产流程

服务流程

实验服务报告内容

1.          本公司构建载体的，提供载体及带有载体的菌液各一份及相关的序列信息；

2.          构建成功的稳定细胞株，转染后需要检测的，参考相关实验服务；

3.          构建稳定细胞株实验所需试剂耗材、仪器设备信息、实验方法各一份；

4.          其他与构建稳定细胞株技术服务相关的信息。