蛋白质综合分析
主要承接外包技术服务项目：
蛋白质理化检测、代谢组学、蛋白质组学、糖类分析
蛋白质、多肽药物的整套研究服务
| 项 目 | 方 法 |
| 活性筛选 | 酶活性，免疫学活性，理化性质等 |
| 初步提取 | 盐析、分级沉淀、有机溶剂沉淀等 |
| 富集浓缩 | 沉淀、超滤、PEG浓缩等 |
| 精细纯化 | 离子交换、分子筛、疏水、反相、亲和等技术 |
| 性质检测 | 活性 | 酶活性，免疫学活性，生物学活性 |
| SDS | 常规电泳分析 |
| HPLC | 高效液相分析 |
| 分子量 | MALDI-TOF质谱分析 |
| 聚合情况 | SDS电泳分析，质谱分析 |
| 氨基酸组成分析 | 全谱氨基酸检测（43种） |
| 肽质量指纹图谱 | 质谱分析，HPLC（SEC） |
| 序列分析 | 全序列 | Edman降解，串联质谱 |
| N端序列 | Edman降解 |
| C端序列 | 串联质谱 |
| 随机序列 | 串联质谱 |
| N端均一性 | Edman降解 |
| 二硫键分析 | 还原烷基化 + 质谱分析 |
| 药物蛋白鉴定 | 数据库检索，一级结构分析 |
| 重头测序 | 串联质谱 |
实验室仪器配置清单 见附件1
具体介绍
第一部分：液相方面
| 检测仪器 | 纯化对象 |
| 1. 快速蛋白纯化系统ÄKTA avant 25（美国GE） | A. 天然蛋白质,多肽 |
| 2. 快速蛋白纯化系统ÄKTA explorer（美国GE） | B. 合成的多肽类药物 |
| 3. 快速蛋白纯化系统ÄKTA Purifier 10（美国GE） | C. 重组蛋白质,多肽 |
| 4. 纳流二维高效液相Agilent Nano 2D-HPLC（美国Agilent） | D. 其它生物大分子 |
| 色谱柱配置 |
| 离子交换 | 预装柱：Mono Q/S系列(高分辨)；Source Q/S系列(快速)；HiLoad系列(高载量) |
| 体积排阻 | 预装柱：Superdex系列(高分辨)；Superose系列(宽范围)；HiPrep系列(高载量) |
| 疏水层析 | 预装柱：Resource PHE/ETH/ISO(高分辨)；HiPrep系列(高载量) |
| 亲和层析 | 预装柱：HisTrap HP系列(高分辨)；GSTrap HP(高分辨) |
| 反相层析 | 预装柱：Zorbax 300SB C-3/8/18； Zorbax Eclipse XDB C-18；其它各种柱子 |
第二部分：测序方面
蛋白多肽自动测序仪
| N端测序技术(Edman降解法)主要特点 |
| N端测定 | 只针对蛋白质、多肽、小肽等的 N 末端氨基酸进行检测 |
| 检测能力 | N 端连续 60 个以上的氨基酸 |
| 样品来源 | 天然（动物/植物/微生物）；合成多肽；表达重组等 |
| 应用方面 | 蛋白质多肽序列：结构验证，断点寻找，修饰判断，定位活性区域等等 |
| 急速检测 | 合格样品，1个工作日可以出结果 |
氨基酸N端测序实例结果
序列结果：N-Ser-ILe-Gln-Met-Val-Leu-C
第三部分：质谱鉴定
| 质谱检测项目 |
| 1、生物大分子的分子量精确测定 |
| 2、蛋白质的肽质量指纹图谱分析 |
| 3、已知蛋白质的高通量鉴定分析 |
| 4、未知蛋白的部分或全序列分析 |
| 5、蛋白质多肽的二硫键定位分析 |
| 6、混合蛋白快速鉴定与测序分析 |
| 7、iTRAQ、SILAC、Label-free |
| 8、PEG 修饰蛋白药物的质谱分析 |
第四部分：糖类分析——寡糖/低聚糖定性定量分析
| 离子色谱ICS 5000在糖分析中的应用 |
| 1、糖定性分析，糖定量分析； |
| 2、单、双糖，低聚糖，多聚糖分析； |
| 3、氨基糖、中性糖、酸性糖、糖醇及其它糖衍生物 |
第五部分：氨基酸组成分析
| 质谱40OO Q-Trap在氨基酸分析中的应用 |
| 1、氨基酸组成分析（45种） |
| 2、氨基酸定量分析 |
| 3、游离氨基酸分析 |
| 4、检测氨基酸类别：A、必需氨基酸；B、必需氨基酸衍生物；C、氨/能量新陈代谢物；D、硫新陈代谢物；E、附加代谢物 |
第六部分：综合技术服务 —— 样品提取；SDS电泳；PVDF转膜；活性检测；有机酸分析；脂肪酸分析等
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