核酸纯化在分子生物学实验室已经广泛应用。怎样获得高质量、高纯度的DNA或RNA样品对下游实验的顺利进行至关重要，因此，对纯化后的核酸进行鉴定也是必不可少的步骤。本文简单的回顾学习一下核酸鉴定的方法。核酸鉴定包括：浓度/纯度鉴定+完整性鉴定 1.浓度/纯度鉴定 （1）紫外分光光度计：原理：由于核酸中的碱基都具有共轭双键，所以具有紫外光吸收性质。...
若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽，若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液，对浓度更小的样品，可采用荧光分光光度法。...
检测原理 微量紫外分光光度法检测的是核酸的纯度和含量，DNA和RNA在260nm处有最大的吸收峰，蛋白质在280nm处有最大的吸收峰，盐和小分子则集中在230nm处。因此，可以用260nm波长的吸光度测定DNA或RNA浓度，其吸收强度与DNA和RNA的浓度成正比。 对于一个核酸样品，建议先电泳检测，再用紫外分光光度仪检测，电泳可以判断样品是否提取成功，以确认是否还需进行纯度和浓度测定。...
/A280)估计核酸的纯度.DNA的比值为1.8,RNA的比值为2.0.若DNA比值高于1.8,说明制剂中RNA尚未除尽.RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低.270nm存在高吸收表明有酚的干扰.当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA.或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质.紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/...
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