T/CVDA 3-2022
动物埃博拉病毒中和抗体检测技术

Detecting technique of neutralization antibody against Ebola virus in animals

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标准号

T/CVDA 3-2022

发布

2022年

发布单位

中国团体标准

当前最新

T/CVDA 3-2022

 

 

适用范围

埃博拉出血热（Ebola hemorrhagic fever，EHF）是由埃博拉病毒（Ebola virus，EBOV）感染引起的急性，发热并伴有严重出血症状的烈性人兽共患病。EBOV是致死率最高的病原之一，感染后致死率最高可达90%。自1976年EHF在扎伊尔东北部和苏丹南部暴发以来，至今发生过多次疫情。研制能够快速鉴定病毒感染的血清学方法，以采取针对性治疗措施、预防病毒扩散，非常重要。 本标准利用水泡性口炎病毒（VSV）的反向遗传操作系统，以EBOV的糖蛋白基因GP替换VSV基因组的糖蛋白基因G，同时表达增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP），构建成表达EGFP的嵌合型重组病毒VSVΔG-EBOVGP-EGFP。EBOV的GP蛋白是诱导中和抗体产生的唯一结构蛋白，此重组病毒VSVΔG-EBOVGP-EGFP表达EBOV的GP蛋白，可以与含有EBOV中和抗体的血清特异性结合并被血清中和，阻断病毒感染。目前检测EBOV中和抗体的方法主要是通过EBOV活毒在生物安全四级实验室进行，受试验条件限制且生物安全风险高。以VSVΔG-EBOVGP-EGFP代替EBOV活毒进行EBOV中和抗体检测可以在BSL-2实验室进行操作。 本标准以人或动物血清为检测对象，以EBOV的糖蛋白基因GP替换VSV基因组的糖蛋白基因G拯救得到的嵌合型重组病毒VSVΔG-EBOVGP-EGFP为检测抗原，可以与含有EBOV中和抗体的血清特异性结合并被血清中和，阻断病毒感染。该检测技术可以对疑似感染EBOV的人或动物血清、或经EBOV疫苗免疫的人或动物血清的中和抗体水平在BSL-2实验室进行评价。

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