转基因植物中普遍含有外源基因如花椰菜花叶病毒35S(CaMV 35S)启动子、根癌农杆菌终止子(tNOS)或其他特定目标基因序列等,聚合酶链反应(PCR)方法对这些特定序列具有高灵敏度和高稳定性,是转基因生物检测的首选方法,但该方法较为复杂,检测成本偏高且耗时长。其他常用方法还有酶联免疫吸附测定、新一代测序、基因芯片和电化学分析等。...
核酸水平的检测可分为定性和定量两种。由Life Technologies公司研发的转基因提取试剂盒,可用来从复杂样品中提取基因组DNA,继而用于PCR或其他分子生物学技术。该试剂盒可处理的样品类型包括原材料、食品成分、加工产品例如种子、谷物、面粉、大豆粉、肉类、奶制品、果汁等。...
核酸水平的检测 主要检测报告基因、启动子和终止子,是当前转基因产品检测的重要手段。最常见的是对camv35s启动子或nos终止子的检测,但是仅仅鉴定筛选基因,已经不能满足转基因产品检测的要求。这是因为35s启动子存在于椰菜花叶病毒,nos终止子存在于植物病毒ti质粒中,抗生素类的报告基因自然界中也普遍存在,因而仅是检测筛选基因,极易出现假阳性结果,同时也达不到鉴定转基因植物的目的。...
序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 cDNA 序列或预测的基因序列设计引物,用反转录-PCR ( RT- PCR) 方法扩增 cDNA 上的一部分序列。如果没有目的基因的基因组序列,可以用其他物种中基因的序列去搜索已知序列的 cDNA。...
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