⑤ 第二天,按 1:500 稀释过夜培养宿主菌至 LB 培养液,37°C 250 r/min 振摇培养 6 h,用于滴度检测。⑥ 计数用于滴度测定的培养板上的克隆数,计算末经结合筛选的噬菌体和 R-1 噬菌体的滴度、及筛选过程中噬菌体结合的比例。...
⑤ 第二天,按 1:500 稀释过夜培养宿主菌至 LB 培养液,37°C 250 r/min 振摇培养 6 h,用于滴度检测。⑥ 计数用于滴度测定的培养板上的克隆数,计算末经结合筛选的噬菌体和 R-1 噬菌体的滴度、及筛选过程中噬菌体结合的比例。...
割取一张比胶边缘大 1 cm 的 30 MM 滤纸,将其置于胶上,将玻璃板倒转。26. 拿开玻璃板,将胶放到凝胶干燥器中 60℃ 干燥 1~1.5 h。27. 建立胶的自显影影像。通过密度计量学或磷光摄影扫描,也可以切下胶中含有相应片段的部分,利用液闪仪计数。...
上述反应结束时,加入 1 单位不含 RNA 酶的 DNA 酶约 1 μg,继续 37℃ 保温 10 min。4. 用 TE 缓冲液(pH 7.6) 稀释反应液至 100 μl,取 1 μl 测量总放射活性和可被 TCA 沉淀的放射活性。通过掺入的可被 TCA 沉淀物质的放射活性比例,计算反应合成的 RNA 探针重量和特异性活性。5....
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