SCIEX PA 800 Plus药物分析系统与试剂盒毛细管凝胶电泳法(CGE-LIF)对质粒DNA的纯度分析01质粒DNA作为基因制剂的传递载体,被广泛应用于基因治疗、细胞治疗、疫苗等生物制品领域。质粒DNA主要有三种拓扑结构,超螺旋、开环和线性形式。超螺旋质粒在细胞转染及基因表达方面优于其他形式,所以,高质量、高纯度的超螺旋质粒DNA是确保基因制剂安全性和有效性的前提条件。...
相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而开环双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。...
相同分子量的线状、开环和超螺旋DNA在琼脂糖凝胶中移动速度是不一样的,超螺旋DNA移动最快,而开环双链DNA移动最慢。如在电泳鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条DNA带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。...
该毛细管凝胶电泳(CGE-LIF)方法具有如下优势:分离度好:超螺旋、开环及线性质粒可以得到基线分离,易于产品的定量及质控;重复性好:超螺旋质粒峰的迁移时间相对标准偏差(RSD)<0.3%,纯度RSD<0.5%(n=18);适用范围广:适用于不同大小范围的质粒的分析;操作简单:具有商品化的试剂盒,自动化程度高;灵敏度高:使用激光诱导荧光的检测模式,可提供超高的检测灵敏度;符合法规:仪器具有操作(OQ...
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