2、交联度(C):交联度示凝胶溶液中交联剂占单体和交联剂总量的百分含量。C = [b/(a+b)]×100%交联度决定凝胶筛孔的zui大直径。交联度过高,凝胶不透明,缺乏弹性。交联度过低,呈糊状。要获得透明而有合适机械强度的凝胶,单体用量高时,交联剂量应减少;单体用量低时,交联剂量应增大。 ...
凝胶总浓度太小,孔径太大,样品中各蛋白质分子均随缓冲液推进,不能得到很好的分离。九、PAGE注意事项:1、避免吸入、皮肤接触Acr和Bis试剂。2、制胶时要充分摇匀,最后加TEMED。3、Acr和Bis要避光保存。4、混合溶液的保存不宜超过一个月。5、固体胶切忌倒入水池。6、玻璃管表面应光滑洁净,用蔗糖溶液封住管底,否则会造成凝胶与玻璃管之间产生气泡。7、尽量不要破坏胶面,否则样品区带不平整。...
凝胶柱和无胶筛分CGE的关键是毛细管凝胶柱的制备,常用聚丙烯酰胺凝胶栓来进行DNA片段分析和测序.测定蛋白质和肽的分子量常用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDS-LPAGE).如将聚丙烯配胺单体溶液中的交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)浓度降为零,得到线性非交联的亲水性聚合物用作操作溶液,仍有按分子大小分离的作用,称无胶筛分.此法简单,使用方便,分离能力比CGE差.4....
凝胶柱和无胶筛分CGE的关键是毛细管凝胶柱的制备,常用聚丙烯酰胺凝胶栓来进行DNA片段分析和测序.测定蛋白质和肽的分子量常用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳(SDS-LPAGE).如将聚丙烯配胺单体溶液中的交联剂甲叉双丙烯酰胺(Bis)浓度降为零,得到线性非交联的亲水性聚合物用作操作溶液,仍有按分子大小分离的作用,称无胶筛分.此法简单,使用方便,分离能力比CGE差.4....
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