接下来的筛选在 100 mm LB 平板上进行,次级筛选用约 2000 pfu/平板,而三级筛选用约 300~500 pfu/平板。在获得均一性克隆之前(通常在三级筛选期间),应进行对照实验排除可能与探针 GST 融合部分相互作用的克隆。做该实验时可将滤膜剪成两半,用与标记的 GST-目的蛋白融合体探测其中一半,而另一半用标记的 GST 或未标记的对照 GST 融合蛋白质检测。...
二倍体纤维细胞促生长试验人二倍体细胞株 WI28 MRc525cm2细胞培养瓶,5%血清,每瓶接种1.5X105细胞连传3代,每代血清浓度和接种细胞数相同,每代培养7天,每代接种二个细胞瓶,36℃±2℃培养。以同样条件用已知参考血清进行平行培养。每代收获细胞计数,计算每批待检血清与参考血清的相对生长率(RGR)。...
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