AWWA ACE59930
三种检测水中隐孢子虫的方法比较

Comparison of Three Methodologies for the Detection of Cryptosporidium in Water

标准号

AWWA ACE59930

发布

1970年

发布单位

SCC

当前最新

AWWA ACE59930

 

 

适用范围

最近的研究表明，在最终的再生水中可以发现隐孢子虫，其含量高于以前报告的水平，这是在实施修订的病原体检测方法之前报告的。此外，最近的研究表明，使用组织培养测定法在最终的再生水中检测到了传染性隐孢子虫，以评估潜在的人体传染性（Quintero-Betancourt 等人，2003 年）。当前的检测方法（USEPA 方法 1623）允许直接计数隐孢子虫；但是，它无法评估这些生物体感染人类的潜在活力或能力。聚合酶链式反应 (PCR) 是一种新方法，建议用于识别用方法 1623 处理的水样中的隐孢子虫（Xiao 等人，2000 年）。PCR 可检测病原体的 DNA，并且可以针对物种和基因型进行特异性检测。因此，本研究的目的是：评估和比较单独使用方法 1623 或与 PCR 结合使用在再生水中检测隐孢子虫的效果；确定佛罗里达州中部再生水中隐孢子虫的含量；并确定检测到的生物是否可行且是否对人类具有潜在感染性。USEPA 方法 1623 通过将 20 至 50 升水浓缩到 Envirochek HV 过滤器（Pall Gelman，密歇根州安娜堡）上进行。将目标生物从过滤器中洗脱出来，通过离心浓缩，并使用免疫磁性分离 (IMS) 分离，然后进行免疫荧光染色程序 (IFA) 进行鉴定（USEPA 方法 1623，2001 年）。使用 DNazol 试剂（Invitrogen，加利福尼亚州卡尔斯巴德）分离和制备用于 PCR 的隐孢子虫 DNA。使用针对所有隐孢子虫物种共有的小亚基 rRNA 片段的特异性引物（Xiao 等，2000 年）来扩增 DNA。包括 4 个参考文献、表格。

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