ASTM F2602-08
用多角度光散射检测（SEC-MALS）通过尺寸排阻色谱法测定壳聚糖和壳聚糖盐的摩尔质量的标准测试方法

Standard Test Method for Determining the Molar Mass of Chitosan and Chitosan Salts by Size Exclusion Chromatography with Multi-angle Light Scattering Detection (SEC-MALS)

被代替

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标准号

ASTM F2602-08

发布

2008年

发布单位

美国材料与试验协会

替代标准

ASTM F2602-08e1

当前最新

ASTM F2602-18

 

 

适用范围

壳聚糖的脱乙酰化程度以及摩尔质量和摩尔质量分布决定了壳聚糖在应用中的功能。例如，功能和生物效应高度依赖于聚合物的组成和摩尔质量。该测试方法描述了壳聚糖氯化物和谷氨酸盐以及壳聚糖碱的摩尔质量的测量程序，但原则上它适用于任何壳聚糖盐。测量的摩尔质量是壳聚糖乙酸盐的摩尔质量，因为流动相含有乙酸盐作为抗衡离子。该值可以进一步转换为作为碱的壳聚糖或母盐形式（氯化物或谷氨酸盐）的相应摩尔质量。光散射是可用于测定绝对摩尔质量和结构的极少数方法之一，并且它适用于任何方法中最广泛的摩尔质量范围。将光散射检测与根据大小对分子进行分类的尺寸排阻色谱 (SEC) 相结合，能够分析多分散样品，并获得有关支化和分子构象的信息。这意味着对于大多数样品，可以获得摩尔质量和尺寸的数均值和质量平均值。此外，人们还能够计算摩尔质量和尺寸的分布。多角度激光散射 (MALS) 是一种在一系列不同角度上同时测量散射光的技术。 MALS 检测可用于获取分子尺寸信息，因为该参数由散射光的角度变化决定。原则上，摩尔质量可以通过检测单个低角度（LALLS）的散射光来确定。然而，与 LALLS 相比，MALS 的优点是：(1) 在较大角度时噪音更少，(2) 通过在多个角度进行检测大大提高了测量精度，(3) 检测角度变化的能力允许确定尺寸、支化、聚集和分子构象。尺寸排阻色谱法使用的柱子通常填充有包含均匀孔网络的聚合物颗粒，溶质和溶剂分子可以扩散到这些孔中。在孔中时，分子被有效地捕获并从流动相流中去除。在孔中的平均停留时间取决于溶质分子的大小。大于填料平均孔径的分子被排除，几乎没有保留；这些首先在柱的空隙体积中被洗脱。可以穿透孔的分子将具有更大的可用于扩散的体积，它们将根据其分子大小而被保留，较小的分子最后洗脱。对于聚电解质，建议针对洗脱缓冲液进行透析，以消除光散射摩尔质量测定中的唐南型伪影 (1, 2)。然而，在本方法中，光散射检测之前的尺寸排阻色谱步骤是透析步骤的有效替代。样品在含有大量过量洗脱缓冲液的 SEC 柱上分离 30 至 40 分钟，因此当样品到达 MALS 检测器时与洗脱缓冲液完全平衡。
1.1 本测试方法涵盖壳聚糖摩尔质量的测定壳聚糖盐，用于生物医学和制药应用，以及通过多角度激光散射检测 (SEC-MALS) 尺寸排阻色谱法用于组织工程医疗产品 (TEMP)。壳聚糖盐的表征指南已出版为 Guide F 2103。
1.2 壳聚糖和壳聚糖盐......

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