把上清转移到一个新管中,上清里含冰冷的溶解了的微管蛋白二聚体和微管相关蛋白。4. 上清在 37℃ 温育 30~45 分钟。5. 在 25℃ 以 40000 g 离心 30 分钟收集组装了的微管。用一个 Dounce 的匀浆器,用步骤 2 中使用的缓冲液以 1/5~1/4 的体积重悬所得到的微管沉淀物,重悬的微管放到一个干净的离心管中。6. 在冰/水混和物中冰浴 30 分钟。7....
撰文 | 言笑微管细胞骨架是真核细胞的关键结构和动力学组成部分。微管组装成各种各样的动态阵列和结构,参与多种细胞功能,例如细胞分裂、运动、形状和细胞内运输等。...
图 2: KLP1队列结合微管的两种连续构象。 和动力蛋白OAD正好相反,驱动蛋白KLP1是沿着微管正向移动的分子马达。研究组发现,KLP1位于CA动力臂的一端 (C2微管第9号微管原纤维附近),其头部结合在C2 微管上,为整个动力臂的位移提供能量。在ATP预处理的样品中,作者发现了KLP1 的两种连续的微管结合态(MTBS1和MTBS2)的构象变化(图2)。...
微管的装配和动态过程都到严格地控制,同时一种名为stathmin的磷蛋白也是微管去稳定的一个调节子,stathmin的调控作用至今还具有争议,一种理论认为其可以通过分离微管单元来间接减少多聚体,而另一种观点则认为其可以通过一种未知的机制来直接扮演微管的作用。 ...
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