(6) 用 20 倍柱体积的缓冲液 C ( 低)冼柱可以再生亲和层析柱,若要长期保存则应加入终浓度为 0.02% ( V/V ) 的 NaN4。4. 用 Mono Q 层析法纯化 U1 snRNP(1) 用 20 倍体积的缓冲液 Q-1000 清洗层析系统。(2) 用与步骤 ① 同样体积的缓冲液 Q-50 洗柱并平衡。测定 280 nm 光吸收值并以此值作为零点。...
节省甘油的一个窍门是,先在高的带刻度的量筒中进行透析,不要搅拌。透析袋内的水很快从袋内透出这就是浓缩 3 倍的原因且因水的密度低于 50% 甘油储存缓冲液,故会浮在量筒的上层。小心地倾出缓冲液上层的 10%~20%, 以去除大部分的水,然后使量筒中的缓冲液混匀达到平衡。这样可有效地替换缓冲液而不必用更多的甘油。...
实验第一天,以每 90 mm 培养皿 5x105 个细胞的密度,用适当的含血清生长培养基将指数生长的细胞(如 CHO 细胞)铺至培养皿上,在含 5%CO2 的 37°C 孵箱内培养细胞 16 h。2. 第二天,按预实验确定的次数用规格为 22#的针头将高分子质量的 DNA 剪切成 45kb 至 60kb 大小的片段(见材料部分关于基因组 DNA 的说明)。...
加一抗:用含蛋白质的溶液,如含羊IgG的PBS制备不同稀释度的抗体。单克隆抗体最好来自杂交瘤细胞培养上清(特异性抗体浓度为20-50ug/m1;以1:10稀释度作起点为佳)。小鼠腹水或纯化的单克隆抗体和多克隆抗体以及粗制的多克隆抗血清应测试一定范围内的稀释度,从而使特异性抗体浓度达到0.01-1Pg/ml。...
Copyright ©2007-2022 ANTPEDIA, All Rights Reserved
京ICP备07018254号 京公网安备1101085018 电信与信息服务业务经营许可证:京ICP证110310号