3.1.1.5 分子量 分子量是聚乙二醇对重组原型蛋白是否正确修饰的标识,可采用MALDI-TOF-MS等方法测定制品的平均分子量。 3.1.1.6 等电点 修饰蛋白或多肽的等电点可能发生偏移,一定程度上可反映聚乙二醇的修饰程度。可采用水平薄板等电聚焦电泳、毛细管等电聚焦电泳或全柱成像毛细管等电聚焦电泳等方法确定修饰物的等电点范围。...
一般情况下,我们采用电喷雾电离(ESI)和基质辅助激光解吸电离(MALDI)。质谱分析法的优点是能够进行分子级的绝对质量数测量,而不是以整个样品的平均分子量进行测量,从而使混合物的处理更加简单。串联质谱(MS/MS)可提供与重复化学单元、端基和主链连接性有关的详细可靠的结构信息。仪器操作模式质谱仪可测量一个离子的质荷比(m/z)和强度。...
将含有单体的高分子溶液通过色谱柱先进行分离得到高分子和单体两个峰。采用外标法,制作已知单体浓度的标定线。然后,量取单体的峰高,用标定线求得单体的含量,最小检知量为0.03%。 同理可进行混合溶液中高分子含量的测定,此时,需选择小孔径的色谱柱,使高分子全部在渗透极限排出,得到一个对称的窄峰便于进行定量计算。...
快原子轰击的原理是,一束高能粒子,如氩、氙原子,射向存在于液态基质中的样品分子而得到样品离子,这样可以得到提供分子量信息的准分子离子峰和提供化合物结构信息的碎片峰。快原子轰击操作方便、灵敏度高、能在较长时间里获得稳定离子流。当用于绝大多数生物体中寡糖及其衍生物的分析时,可测分子量达6000。而且在该质量范围内,其灵敏度远高于在15000 范围 内新一代全加速仪器的灵敏度。...
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