蛋白质组学技术筛选大鼠肝脏大部切除后肝再生相关差异表达蛋白

[摘要] 　目的:应用蛋白质组学技术观察大鼠肝脏大部分切除术后蛋白表达情况,筛选肝脏切除后肝再生相关的差异表达蛋白。方法:大鼠随机分为肝大部切除组( n = 35) 和假手术对照组( n = 5) 。肝大部切除组大鼠无菌条件下切除肝左外叶、左中叶和中叶共约70 %肝脏;假手术组大鼠仅开腹,不行肝大部切除。肝大部切除术后不同时间点(2 、12 、24 、36 、48 、72 、168 h) 各处死5 只大鼠,取右叶肝组织,提取大鼠肝脏总蛋白,以假手术组为对照,进行二维电泳和质谱分析,筛选差异表达蛋白,并对其中差异显著蛋白进行Western 印迹鉴定。结果:电泳图谱显示肝脏70 %切除术后2 h 差异表达蛋白点开始增多,36 h 达到高峰;共筛选出78 个差异表达蛋白点,质谱技术鉴定出其中35 个有意义的蛋白点。35 个差异蛋白根据动态变化趋势可分为5 类:3 类丰度上调蛋白和2 类丰度下调蛋白(各自间上调或下调时间和幅度均有所差异) ;这些蛋白主要涉及以下代谢途径:
氧化应激反应、急性期反应蛋白、脂类代谢蛋白、能量代谢的酶类、信号转导、神经递质降解等,部分蛋白功能未知。Western 印迹鉴定证实其中的prohibitin 蛋白在肝大部切除术后2 h 开始上调,36 h 达高峰,48 h 后趋于正常水平。结论:多种信号和代谢途径参与肝脏大部切除后的肝脏再生过程。