肉苁蓉和补阳还五汤对动物模型的神经保护作用研究

细胞信号传导通路与疾病具有相关性，PI3K/Akt/Bcl-2是一条重要的信号通路，这条通路揭示的细胞凋亡的具体调控方式有助于进一步理解细胞凋亡信号通路如何在疾病的发生发展中发挥生物学效应。将药物应用于帕金森动物模型和脑出血大鼠模型上进行研究，有助于研究PI3K、Akt、Bcl-2蛋白表达对神经细胞的影响，进而探讨药物对神经系统保护作用机制。

帕金森动物模型在阐明帕金森的发病机制，测试新的治疗方案及药物的研究中，具有十分重要的作用。啮齿类动物、树鼩和灵长类动物等采用不同造模方法所建立的PD 动物模型都拥有自己的优势和局限性，所表现出的临床特征和病理机制与人类有所不同。理想的帕金森动物模型可以模拟人类疾病的损伤分化及随时间的变化。美迪西提供新药研发外包服务，可以根据客户的需求提供各种有效的动物模型，如抑郁症动物模型、帕金森病动物模型、精神病动物模型等，用来检测药物的有效性。常规的神经系统疾病有：精神病、帕金森病、抑郁、疼痛（中枢）等，通过大小鼠、豚鼠等进行动物实验。

磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是一系列的级联反应过程，是一条经典的调节细胞存活、分化及凋亡信号转导通路，在生理和病理过程中起关键作用，并通过调节下游相关蛋白的活化过程发挥重要的生物学效应。由于神经细胞凋亡与一些老年性记忆减退或丧失之间有紧密联系，因此人们开始关注PI3K/Akt信号转导在神经系统发育和学习记忆中的作用机制。

Bcl-2可促进离断的神经轴突再生哺乳类动物中枢神经系统的大多数神经元在发育的一定阶段即丧失再生其离断的轴突的能力，这既与神经元本身的状态有关，也与神经元外环境有关。研究表明，神经元特定的基因表达程序控制着神经轴突的再生能力。BAX是与BCL-2同源的水溶性相关蛋白，是BCL-2基因家族中细胞凋亡促进基因，BAX的过度表达可拮抗BCL-2的保护效应而使细胞趋于死亡，目前多和BCL-2一起用于肿瘤的研究。

1、肉苁蓉在大鼠帕金森动物模型上的研究

肉苁蓉对帕金森病(PD)模型大鼠行为学及中脑黑质-纹状体组织PI3K、Akt、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响，探讨其对神经细胞的保护作用机制。方法是将48只健康SD雄性大鼠随机分为正常组、溶剂对照组、模型组、肉苁蓉低、中、高剂量组6组，采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD大鼠模型，给予肉苁蓉水煎剂后，第3、7、14天分别进行行为学步幅试验。第14天行为学检测后，处死大鼠，提取黑质-纹状体蛋白，Western Blot检测PI3K、Akt、Bcl-2、Bax蛋白的表达。

结果发现肉苁蓉干预14天后，与模型组比较，中、高剂量组步幅明显增大(P <0. 01)，低、中、高剂量组PI3K、Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax值明显升高(P <0. 01或P <0. 05)，中剂量组Akt蛋白表达明显升高(P <0. 01)，低、中、高剂量组Bax表达明显降低(P <0. 01)。  

因此肉苁蓉能改善帕金森病模型大鼠的行为障碍，其对多巴胺神经细胞的保护作用可能是通过影响PI3K/Akt信号通路，上调Bcl-2表达、下调Bax表达、升高Bcl-2/Bax值，进而抑制神经细胞的凋亡实现的。

2、补阳还五汤在脑出血大鼠模型上的研究

研究补阳还五汤对脑出血大鼠血肿周围神经元凋亡的影响及作用机制。方法是将72只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、银杏叶片组，除假手术组，其余3组建立大鼠脑出血模型。造模后第2天开始，补阳还五汤组、银杏叶片组分别灌胃给予补阳还(kg五汤26 g/·d)、银杏叶片3.5 mg/(kg·d)，假手术组及模型组灌胃给予等量生理盐水，连续给药14 d。末次给药后，取脑组织，TUNEL法检测神经元凋亡，免疫组织化学法检测PI3K、Akt、Bcl-2、BAX蛋白表达，干湿重法检测脑组织水含量，伊文思蓝法检测血脑屏障通透性。

结果发现:

(1)与假手术组比较，模型组大鼠脑组织神经元凋亡数目、脑组织水含量、伊文思蓝含量及PI3K、Akt、Bcl-2、BAX蛋白表达增加(P0.05)；

(2)与模型组比较，补阳还五汤组、银杏叶片组凋亡神经元数目、BAX蛋白表达、脑组织水含量、伊文思蓝含量显著降低(P0.05)，PI3K、Akt、Bcl-2蛋白表达明显升高(P0.05)；

结果表明补阳还五汤可能通过降低血脑屏障通透性，减轻脑水肿，激活PI3K/Akt信号转导通路，进而调控Bcl-2与BAX蛋白表达比值，起到抑制脑出血神经元凋亡、保护脑组织的作用。