放疗敏感性不同宫颈癌组织的蛋白质组学比较研究

[摘要] 　目的:比较放疗敏感性不同的早期宫颈癌组织之间蛋白质组的差异,为确定宫颈癌放疗敏感性相关标志物提供依据。方法:收集进行治疗前的早期宫颈癌组织标本。根据放疗后WHO实体瘤疗效判断标准,选择其中对放疗敏感和不敏感的标本分为高敏感组和低敏感组。提取组织总蛋白,进行双向凝胶电泳得到凝胶图谱,采用PD2quest 7. 0软件进行匹配和差异分析,识别两组之间表达差异蛋白点。将部分差异蛋白点进行胶内原位切割、酶解后进行MALD I2TOF2MS分析,获取肽质量指纹图,数据库搜索鉴定蛋白质。应用Western印迹技术验证筛选的部分差异表达蛋白的表达。结果:建立了分辨率高、重复性好的宫颈癌放疗高敏感组和低敏感组的双向凝胶电泳图谱。高敏感组蛋白点(754 ±64)个( n = 5) ,低敏感组蛋白点(777 ±48)个( n = 5) ,组间平均匹配率为87. 6%。选择部分差异在2倍以上的蛋白斑点进行质谱分析, 8个差异表达蛋白被成功鉴定,其中5个蛋白质在高敏感组高表达, 3个蛋白质在高敏感组低表达。Western印迹结果与蛋白质组筛选结果基本一致。结论:放疗高敏感组和低敏感组宫颈癌组织间存在蛋白表达的差异,这些差异表达的蛋白可能与放疗敏感性有关。